复合干扰素突变体在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析
복합간우소돌변체재필적효모중적표체、순화급활성분석
Expression,Purification and Activity Analysis of Consensus Interferon Mutant Produced in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2003年 3期 317-320 ,共4页

    于长明%付玲%齐连权%张晓鹏%于婷%来大志%王海涛%陈薇

    우장명%부령%제련권%장효붕%우정%래대지%왕해도%진미

    复合干扰素突变体%毕赤酵母%基因表达 複閤榦擾素突變體%畢赤酵母%基因錶達
    복합간우소돌변체%필적효모%기인표체
    根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素突变体基因,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K,将重组载体pMEX-CIFNm用SacⅠ线性化后,转化毕赤酵母GS115.转化子经诱导后,培养上清有抗病毒活性的蛋白产生.经过离子交换,疏水层析,凝胶过滤三步层析纯化,得到了纯度大于95% 的重组复合干扰素突变体,经N端氨基酸序列分析表明,该蛋白N端序列与理论值一致,质谱测定分子量为19.3 kD,与理论值一致.用细胞病变抑制法测定其活性,并结合Lowry法蛋白定量计算其比活性为6×108 IU/mg,与复合干扰素的比活相当.
    근거필적효모밀마자편성합성료복합간우소돌변체기인,극륭지분비형효모표체재체pMEX9K,장중조재체pMEX-CIFNm용SacⅠ선성화후,전화필적효모GS115.전화자경유도후,배양상청유항병독활성적단백산생.경과리자교환,소수층석,응효과려삼보층석순화,득도료순도대우95% 적중조복합간우소돌변체,경N단안기산서렬분석표명,해단백N단서렬여이론치일치,질보측정분자량위19.3 kD,여이론치일치.용세포병변억제법측정기활성,병결합Lowry법단백정량계산기비활성위6×108 IU/mg,여복합간우소적비활상당.
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