植物生理学报
植物生理學報
식물생이학보
ACTA PHYTOPHYSIOLOGICA SINICA
2001年
5期
369-374
,共6页
Rubisco%组装%中间体%羟自由基%低分子量蛋白组分%构象
Rubisco%組裝%中間體%羥自由基%低分子量蛋白組分%構象
Rubisco%조장%중간체%간자유기%저분자량단백조분%구상
将新鲜制备的不含Rubisco的豌豆叶片低分子量(LMW)蛋白组分在离体条件下于室温保温48 h后,经ND-PAGE分析发现,ATP和Mg2+是组装的必需条件.随着Mg2+浓度的增加,组装成的Rubisco量逐渐增加,直至其浓度到2.5 mmol/L后达到平衡.K+对组装有抑制作用,抑制程度随着K+浓度增加逐渐增强,当K+浓度为5 mmol/L时组装被抑制56%,当K+浓度达到40 mmol/L时,组装被抑制高达90%以上;但同样浓度的Na+则没有抑制作用.另外,以羟自由基对豌豆LMW蛋白组分中的大亚基进行降解处理,对大亚基专一性降解肽谱与对全酶中的相同,也能产生37 kD的降解肽段.而且,预先经ATP和Mg2+处理的样品,LMW组分中37 kD的大亚基降解条带会消失,而在20～30 kD位置附近产生新的降解条带;而K+预处理同样能够产生20～30 kD大亚基的降解条带,但其37 kD的大亚基降解条带没有消失.这说明K+对组装的抑制作用可能是通过与组装中间体结合后产生不利于组装的构象变化实现的.
將新鮮製備的不含Rubisco的豌豆葉片低分子量(LMW)蛋白組分在離體條件下于室溫保溫48 h後,經ND-PAGE分析髮現,ATP和Mg2+是組裝的必需條件.隨著Mg2+濃度的增加,組裝成的Rubisco量逐漸增加,直至其濃度到2.5 mmol/L後達到平衡.K+對組裝有抑製作用,抑製程度隨著K+濃度增加逐漸增彊,噹K+濃度為5 mmol/L時組裝被抑製56%,噹K+濃度達到40 mmol/L時,組裝被抑製高達90%以上;但同樣濃度的Na+則沒有抑製作用.另外,以羥自由基對豌豆LMW蛋白組分中的大亞基進行降解處理,對大亞基專一性降解肽譜與對全酶中的相同,也能產生37 kD的降解肽段.而且,預先經ATP和Mg2+處理的樣品,LMW組分中37 kD的大亞基降解條帶會消失,而在20～30 kD位置附近產生新的降解條帶;而K+預處理同樣能夠產生20～30 kD大亞基的降解條帶,但其37 kD的大亞基降解條帶沒有消失.這說明K+對組裝的抑製作用可能是通過與組裝中間體結閤後產生不利于組裝的構象變化實現的.
장신선제비적불함Rubisco적완두협편저분자량(LMW)단백조분재리체조건하우실온보온48 h후,경ND-PAGE분석발현,ATP화Mg2+시조장적필수조건.수착Mg2+농도적증가,조장성적Rubisco량축점증가,직지기농도도2.5 mmol/L후체도평형.K+대조장유억제작용,억제정도수착K+농도증가축점증강,당K+농도위5 mmol/L시조장피억제56%,당K+농도체도40 mmol/L시,조장피억제고체90%이상;단동양농도적Na+칙몰유억제작용.령외,이간자유기대완두LMW단백조분중적대아기진행강해처리,대대아기전일성강해태보여대전매중적상동,야능산생37 kD적강해태단.이차,예선경ATP화Mg2+처리적양품,LMW조분중37 kD적대아기강해조대회소실,이재20～30 kD위치부근산생신적강해조대;이K+예처리동양능구산생20～30 kD대아기적강해조대,단기37 kD적대아기강해조대몰유소실.저설명K+대조장적억제작용가능시통과여조장중간체결합후산생불리우조장적구상변화실현적.
