中国动脉硬化杂志
中國動脈硬化雜誌
중국동맥경화잡지
CHINESE JOURNAL OF ARTERIOSCLEROSIS
2001年
5期
380-384
,共5页
于书真%范乐明%陈琪%王南%陈秀英%魏恩会
于書真%範樂明%陳琪%王南%陳秀英%魏恩會
우서진%범악명%진기%왕남%진수영%위은회
逆转录病毒%载脂蛋白AI%卵磷脂胆固醇酰基转移酶%基因治疗
逆轉錄病毒%載脂蛋白AI%卵燐脂膽固醇酰基轉移酶%基因治療
역전록병독%재지단백AI%란린지담고순선기전이매%기인치료
为探讨人载脂蛋白AI和卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因在肌源性细胞中异源共表达的可能性,构建含上述基因和新霉素磷酸转移酶基因的多顺反子重组逆转录病毒载体,以此制备重组病毒颗粒并转染小鼠原代肌母细胞及C2C12肌源性细胞株.酶联免疫吸附法和免疫组织化学检测证实转染后的细胞均具有异源共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶的能力.经G418筛选则获得稳定转化的C2C12细胞株,60天后仍能有效共表达人载脂蛋白AI与卵磷脂胆固醇酰基转移酶.聚合酶链反应法检测显示人载脂蛋白AI cDNA与IRES序列均有效整合于靶细胞基因组中.提示以重组逆转录病毒为载体在体外对肌源性细胞进行遗传修饰,再移植回骨骼肌使之在体内长期高效表达载脂蛋白 AI和卵磷脂胆固醇酰基转移酶,可能是一种值得探讨的通过促进胆固醇逆转运途径来防止或减轻高脂血症和动脉粥样硬化的方法.
為探討人載脂蛋白AI和卵燐脂膽固醇酰基轉移酶基因在肌源性細胞中異源共錶達的可能性,構建含上述基因和新黴素燐痠轉移酶基因的多順反子重組逆轉錄病毒載體,以此製備重組病毒顆粒併轉染小鼠原代肌母細胞及C2C12肌源性細胞株.酶聯免疫吸附法和免疫組織化學檢測證實轉染後的細胞均具有異源共錶達人載脂蛋白AI與卵燐脂膽固醇酰基轉移酶的能力.經G418篩選則穫得穩定轉化的C2C12細胞株,60天後仍能有效共錶達人載脂蛋白AI與卵燐脂膽固醇酰基轉移酶.聚閤酶鏈反應法檢測顯示人載脂蛋白AI cDNA與IRES序列均有效整閤于靶細胞基因組中.提示以重組逆轉錄病毒為載體在體外對肌源性細胞進行遺傳脩飾,再移植迴骨骼肌使之在體內長期高效錶達載脂蛋白 AI和卵燐脂膽固醇酰基轉移酶,可能是一種值得探討的通過促進膽固醇逆轉運途徑來防止或減輕高脂血癥和動脈粥樣硬化的方法.
위탐토인재지단백AI화란린지담고순선기전이매기인재기원성세포중이원공표체적가능성,구건함상술기인화신매소린산전이매기인적다순반자중조역전록병독재체,이차제비중조병독과립병전염소서원대기모세포급C2C12기원성세포주.매련면역흡부법화면역조직화학검측증실전염후적세포균구유이원공표체인재지단백AI여란린지담고순선기전이매적능력.경G418사선칙획득은정전화적C2C12세포주,60천후잉능유효공표체인재지단백AI여란린지담고순선기전이매.취합매련반응법검측현시인재지단백AI cDNA여IRES서렬균유효정합우파세포기인조중.제시이중조역전록병독위재체재체외대기원성세포진행유전수식,재이식회골격기사지재체내장기고효표체재지단백 AI화란린지담고순선기전이매,가능시일충치득탐토적통과촉진담고순역전운도경래방지혹감경고지혈증화동맥죽양경화적방법.
