西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY
2003年
3期
5-10
,共6页
冯秀亮%高志敏%杨春荣%雷安民%樊敬庄%窦忠英
馮秀亮%高誌敏%楊春榮%雷安民%樊敬莊%竇忠英
풍수량%고지민%양춘영%뢰안민%번경장%두충영
胚胎干细胞%内细胞团%囊胚%分离%猪
胚胎榦細胞%內細胞糰%囊胚%分離%豬
배태간세포%내세포단%낭배%분리%저
以PMEF为饲养层培养猪7～9日龄囊胚分离ES细胞,ICM初次传代时间为4～7 d,ES细胞传代时间为4～5 d,ES细胞传至1～5代的胚胎数分别为12(18.8%),8(12.5%),5(7.8%),3(4.7%),2(3.1%),并进行体外分化和AKP染色鉴定.对影响猪ES细胞分离与克隆的因素进行比较,结果表明:(1) 9和14日龄小鼠胎儿PMEF饲养层培养9日龄猪囊胚,贴壁率(83.3%,88,9%),ICM形成率(75.0%,77.8%)和1代ES细胞克隆率(25.0%,22.2%)无显著性差异(P>0.05).(2) 7,8和9日龄胚胎随胚龄增加,胚胎贴壁率(5.9%,57.1%,87,9%)和ICM形成率(0.0%,28.6%,81.8%)升高,差异显著(P<0.01).(3) 9日龄囊胚直径0.8～1.2 mm培养36～48 h贴壁,贴壁率100%,ICM形成率100%;直径>1.2 mm囊胚贴壁时间为48～72 h,贴壁率57.1%,ICM形成率57.1%,差异显著(P<0.05).去除直径>1.2 mm囊胚部分滋养层细胞培养36～48 h,贴壁率91.7%,ICM形成率83.3%;(4) 添加外源LIF没有提高贴壁率(86.4%,90.9%;P>0.05)和ICM形成率(81.8%,81.8%;P>0.05).
以PMEF為飼養層培養豬7～9日齡囊胚分離ES細胞,ICM初次傳代時間為4～7 d,ES細胞傳代時間為4～5 d,ES細胞傳至1～5代的胚胎數分彆為12(18.8%),8(12.5%),5(7.8%),3(4.7%),2(3.1%),併進行體外分化和AKP染色鑒定.對影響豬ES細胞分離與剋隆的因素進行比較,結果錶明:(1) 9和14日齡小鼠胎兒PMEF飼養層培養9日齡豬囊胚,貼壁率(83.3%,88,9%),ICM形成率(75.0%,77.8%)和1代ES細胞剋隆率(25.0%,22.2%)無顯著性差異(P>0.05).(2) 7,8和9日齡胚胎隨胚齡增加,胚胎貼壁率(5.9%,57.1%,87,9%)和ICM形成率(0.0%,28.6%,81.8%)升高,差異顯著(P<0.01).(3) 9日齡囊胚直徑0.8～1.2 mm培養36～48 h貼壁,貼壁率100%,ICM形成率100%;直徑>1.2 mm囊胚貼壁時間為48～72 h,貼壁率57.1%,ICM形成率57.1%,差異顯著(P<0.05).去除直徑>1.2 mm囊胚部分滋養層細胞培養36～48 h,貼壁率91.7%,ICM形成率83.3%;(4) 添加外源LIF沒有提高貼壁率(86.4%,90.9%;P>0.05)和ICM形成率(81.8%,81.8%;P>0.05).
이PMEF위사양층배양저7～9일령낭배분리ES세포,ICM초차전대시간위4～7 d,ES세포전대시간위4～5 d,ES세포전지1～5대적배태수분별위12(18.8%),8(12.5%),5(7.8%),3(4.7%),2(3.1%),병진행체외분화화AKP염색감정.대영향저ES세포분리여극륭적인소진행비교,결과표명:(1) 9화14일령소서태인PMEF사양층배양9일령저낭배,첩벽솔(83.3%,88,9%),ICM형성솔(75.0%,77.8%)화1대ES세포극륭솔(25.0%,22.2%)무현저성차이(P>0.05).(2) 7,8화9일령배태수배령증가,배태첩벽솔(5.9%,57.1%,87,9%)화ICM형성솔(0.0%,28.6%,81.8%)승고,차이현저(P<0.01).(3) 9일령낭배직경0.8～1.2 mm배양36～48 h첩벽,첩벽솔100%,ICM형성솔100%;직경>1.2 mm낭배첩벽시간위48～72 h,첩벽솔57.1%,ICM형성솔57.1%,차이현저(P<0.05).거제직경>1.2 mm낭배부분자양층세포배양36～48 h,첩벽솔91.7%,ICM형성솔83.3%;(4) 첨가외원LIF몰유제고첩벽솔(86.4%,90.9%;P>0.05)화ICM형성솔(81.8%,81.8%;P>0.05).
