生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2001年
4期
551-555
,共5页
谭文斌%聂怡玲%罗赛群%朱敏%成光杰%胡维新%彭兴华
譚文斌%聶怡玲%囉賽群%硃敏%成光傑%鬍維新%彭興華
담문빈%섭이령%라새군%주민%성광걸%호유신%팽흥화
DNA足纹分析%聚合酶链式反应%人干细胞因子基因
DNA足紋分析%聚閤酶鏈式反應%人榦細胞因子基因
DNA족문분석%취합매련식반응%인간세포인자기인
一种以PCR介导的、可对任意长度靶DNA片段上的核蛋白结合位点进行DNA足纹作图分析的新方法.原理是：采用被随机降解靶DNA分子作为模板，用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增.首先，利用某种化学试剂或酶如DNaseⅠ对已与蛋白质结合或未结合的双链靶DNA进行随机降解，在一定条件下使每一个DNA分子恰好只有一个位点被切割.然后，这些被随机降解DNA分子即可作为模板，用同位素标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物（正向或反向）进行单链扩增.最后，扩增的单链产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影形成DNA片段梯队，而被蛋白质保护的位点则在DNA片段梯队中形成位置缺口，从而确定DNA与蛋白质相结合的精确位点.该方法被应用对人干细胞因子基因5′旁侧－1190～－273区域的DNA足纹部分作图.
一種以PCR介導的、可對任意長度靶DNA片段上的覈蛋白結閤位點進行DNA足紋作圖分析的新方法.原理是：採用被隨機降解靶DNA分子作為模闆，用標記的跨越整箇模闆的足夠多條特異性引物進行單鏈擴增.首先，利用某種化學試劑或酶如DNaseⅠ對已與蛋白質結閤或未結閤的雙鏈靶DNA進行隨機降解，在一定條件下使每一箇DNA分子恰好隻有一箇位點被切割.然後，這些被隨機降解DNA分子即可作為模闆，用同位素標記的跨越整箇模闆的足夠多條特異性引物（正嚮或反嚮）進行單鏈擴增.最後，擴增的單鏈產物通過變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和放射自顯影形成DNA片段梯隊，而被蛋白質保護的位點則在DNA片段梯隊中形成位置缺口，從而確定DNA與蛋白質相結閤的精確位點.該方法被應用對人榦細胞因子基因5′徬側－1190～－273區域的DNA足紋部分作圖.
일충이PCR개도적、가대임의장도파DNA편단상적핵단백결합위점진행DNA족문작도분석적신방법.원리시：채용피수궤강해파DNA분자작위모판，용표기적과월정개모판적족구다조특이성인물진행단련확증.수선，이용모충화학시제혹매여DNaseⅠ대이여단백질결합혹미결합적쌍련파DNA진행수궤강해，재일정조건하사매일개DNA분자흡호지유일개위점피절할.연후，저사피수궤강해DNA분자즉가작위모판，용동위소표기적과월정개모판적족구다조특이성인물（정향혹반향）진행단련확증.최후，확증적단련산물통과변성취병희선알응효전영화방사자현영형성DNA편단제대，이피단백질보호적위점칙재DNA편단제대중형성위치결구，종이학정DNA여단백질상결합적정학위점.해방법피응용대인간세포인자기인5′방측－1190～－273구역적DNA족문부분작도.
