第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2001年
3期
161-164
,共4页
王尉%朴英杰%娄莉%鲍永耀
王尉%樸英傑%婁莉%鮑永耀
왕위%박영걸%루리%포영요
肌腱细胞%Smad2%Smad4%克隆%MH2结构域%序列测定
肌腱細胞%Smad2%Smad4%剋隆%MH2結構域%序列測定
기건세포%Smad2%Smad4%극륭%MH2결구역%서렬측정
目的从人腱细胞内克隆转化生长因子-β特异的细胞内信号转导基因Smad2、4的功能性结构域-MH2结构域.方法原代培养人腱细胞,从培养的细胞中提取总RNA,逆转录合成单链cDNA;设计引物进行PCR,扩增Smad2、4基因MH2结构域的基因片段,将其定向插入pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α.挑选阳性克隆并进行核苷酸序列测定分析.结果测序结果与Genebank中克隆的基因序列完全一致.结论从人腱细胞中克隆成功Smad2、4基因的MH2结构域,证实了Smad2、4基因在人腱细胞中的表达;提示人腱细胞内存在SMAD2、4信号转导途径,TGF-β对人腱细胞分化的调节可能是通过SMAD2、4信号转导途径实现的.
目的從人腱細胞內剋隆轉化生長因子-β特異的細胞內信號轉導基因Smad2、4的功能性結構域-MH2結構域.方法原代培養人腱細胞,從培養的細胞中提取總RNA,逆轉錄閤成單鏈cDNA;設計引物進行PCR,擴增Smad2、4基因MH2結構域的基因片段,將其定嚮插入pGEM-T載體,轉化大腸桿菌DH5α.挑選暘性剋隆併進行覈苷痠序列測定分析.結果測序結果與Genebank中剋隆的基因序列完全一緻.結論從人腱細胞中剋隆成功Smad2、4基因的MH2結構域,證實瞭Smad2、4基因在人腱細胞中的錶達;提示人腱細胞內存在SMAD2、4信號轉導途徑,TGF-β對人腱細胞分化的調節可能是通過SMAD2、4信號轉導途徑實現的.
목적종인건세포내극륭전화생장인자-β특이적세포내신호전도기인Smad2、4적공능성결구역-MH2결구역.방법원대배양인건세포,종배양적세포중제취총RNA,역전록합성단련cDNA;설계인물진행PCR,확증Smad2、4기인MH2결구역적기인편단,장기정향삽입pGEM-T재체,전화대장간균DH5α.도선양성극륭병진행핵감산서렬측정분석.결과측서결과여Genebank중극륭적기인서렬완전일치.결론종인건세포중극륭성공Smad2、4기인적MH2결구역,증실료Smad2、4기인재인건세포중적표체;제시인건세포내존재SMAD2、4신호전도도경,TGF-β대인건세포분화적조절가능시통과SMAD2、4신호전도도경실현적.
