中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2011年
5期
431-435
,共5页
吴军%王爱桃%闵喆%熊永洁%闫秋月%张苏明
吳軍%王愛桃%閔喆%熊永潔%閆鞦月%張囌明
오군%왕애도%민철%웅영길%염추월%장소명
炎症%β-淀粉样蛋白%白细胞介素1β%肿瘤坏死因子α%NF-κB
炎癥%β-澱粉樣蛋白%白細胞介素1β%腫瘤壞死因子α%NF-κB
염증%β-정분양단백%백세포개소1β%종류배사인자α%NF-κB
目的 探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)促进BV2小胶质细胞产生炎性因子IL-1β和TNFα的作用机制.方法 体外培养BV2小胶质细胞,应用Aβ1-42作用于BV2小胶质细胞,或用吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)预孵育再给予Aβ1-42刺激,实时荧光定量反转录聚合酶链反应法(RT–PCR)检测IL-1β和TNFα mRNA表达;免疫印迹法(Western blot)检测胞核中NF-κB p65及其抑制蛋白胞浆中IkBα的表达.结果 Aβ1-42作用于BV2小胶质细胞后,Westernblot显示胞浆内IkBα表达下降,胞核内NF-κB p65表达明显增加,RT-PCR测定IL-1β和TNFα mRNA的表达增加;给予NF-κB信号通路特异阻断剂PDTC后,胞浆IkBα的下降和胞核内NF-κB p65的增加均被抑制,同时IL-1β和TNFα mRNA的表达亦受到抑制,PDTC的抑制效果呈剂量依赖性.结论 Aβ可通过激活小胶质细胞NF-κB信号通路促进IL-1β和TNFα的表达.
目的 探討β-澱粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)促進BV2小膠質細胞產生炎性因子IL-1β和TNFα的作用機製.方法 體外培養BV2小膠質細胞,應用Aβ1-42作用于BV2小膠質細胞,或用吡咯烷二硫代氨基甲痠鹽(PDTC)預孵育再給予Aβ1-42刺激,實時熒光定量反轉錄聚閤酶鏈反應法(RT–PCR)檢測IL-1β和TNFα mRNA錶達;免疫印跡法(Western blot)檢測胞覈中NF-κB p65及其抑製蛋白胞漿中IkBα的錶達.結果 Aβ1-42作用于BV2小膠質細胞後,Westernblot顯示胞漿內IkBα錶達下降,胞覈內NF-κB p65錶達明顯增加,RT-PCR測定IL-1β和TNFα mRNA的錶達增加;給予NF-κB信號通路特異阻斷劑PDTC後,胞漿IkBα的下降和胞覈內NF-κB p65的增加均被抑製,同時IL-1β和TNFα mRNA的錶達亦受到抑製,PDTC的抑製效果呈劑量依賴性.結論 Aβ可通過激活小膠質細胞NF-κB信號通路促進IL-1β和TNFα的錶達.
목적 탐토β-정분양단백(β-amyloid,Aβ)촉진BV2소효질세포산생염성인자IL-1β화TNFα적작용궤제.방법 체외배양BV2소효질세포,응용Aβ1-42작용우BV2소효질세포,혹용필각완이류대안기갑산염(PDTC)예부육재급여Aβ1-42자격,실시형광정량반전록취합매련반응법(RT–PCR)검측IL-1β화TNFα mRNA표체;면역인적법(Western blot)검측포핵중NF-κB p65급기억제단백포장중IkBα적표체.결과 Aβ1-42작용우BV2소효질세포후,Westernblot현시포장내IkBα표체하강,포핵내NF-κB p65표체명현증가,RT-PCR측정IL-1β화TNFα mRNA적표체증가;급여NF-κB신호통로특이조단제PDTC후,포장IkBα적하강화포핵내NF-κB p65적증가균피억제,동시IL-1β화TNFα mRNA적표체역수도억제,PDTC적억제효과정제량의뢰성.결론 Aβ가통과격활소효질세포NF-κB신호통로촉진IL-1β화TNFα적표체.
