中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
1期
91-97
,共7页
环核苷酸%细胞增殖%cAMP反应序列结合蛋白%活性
環覈苷痠%細胞增殖%cAMP反應序列結閤蛋白%活性
배핵감산%세포증식%cAMP반응서렬결합단백%활성
从癌基因、抑癌基因及转录因子CREB(cAMP反应序列结合蛋白)对CRE DNA序列结合活性的相关性,对db-cAMP处理的小鼠C3H10T1/2转化细胞增殖抑制作用进行了研究.实验结果表明,转化细胞中PKA(蛋白激酶A)活性显著低于正常细胞,而PKC(蛋白激酶C)活性则显著高于正常细胞.斑点印迹和Northern印迹分析显示转化细胞中c-myc和CaM(钙调素)基因表达明显高于正常细胞,而p53基因和Rb基因表达则明显低于正常细胞,这些差别与C3H10T1/2转化细胞增殖失控有关.转化细胞经db-cAMP(1 mmol/L)处理后,细胞增殖受到明显抑制,db-cAMP处理0.5 h后,转化细胞中PKA活性便明显增强,PKC活性则被显著抑制,处理2 h后,c-myc和CaM基因表达下降,而p53和Rb基因表达则增强,这些变化与cAMP抑制C3H10T1/2转化细胞增殖有密切联系.凝胶阻滞电泳分析显示db-cAMP(1 mmol/L)处理短时间内,CREB对CRE DNA序列无结合活性,12 h后开始出现较弱的结合活性,24 h后才明显加强,表明在db-cAMP处理的早期,调控区中含有CRE序列的基因不参与db-cAMP对细胞增殖抑制的调节,即与CREB磷酸化及其相应的DNA结合活性无相关性.
從癌基因、抑癌基因及轉錄因子CREB(cAMP反應序列結閤蛋白)對CRE DNA序列結閤活性的相關性,對db-cAMP處理的小鼠C3H10T1/2轉化細胞增殖抑製作用進行瞭研究.實驗結果錶明,轉化細胞中PKA(蛋白激酶A)活性顯著低于正常細胞,而PKC(蛋白激酶C)活性則顯著高于正常細胞.斑點印跡和Northern印跡分析顯示轉化細胞中c-myc和CaM(鈣調素)基因錶達明顯高于正常細胞,而p53基因和Rb基因錶達則明顯低于正常細胞,這些差彆與C3H10T1/2轉化細胞增殖失控有關.轉化細胞經db-cAMP(1 mmol/L)處理後,細胞增殖受到明顯抑製,db-cAMP處理0.5 h後,轉化細胞中PKA活性便明顯增彊,PKC活性則被顯著抑製,處理2 h後,c-myc和CaM基因錶達下降,而p53和Rb基因錶達則增彊,這些變化與cAMP抑製C3H10T1/2轉化細胞增殖有密切聯繫.凝膠阻滯電泳分析顯示db-cAMP(1 mmol/L)處理短時間內,CREB對CRE DNA序列無結閤活性,12 h後開始齣現較弱的結閤活性,24 h後纔明顯加彊,錶明在db-cAMP處理的早期,調控區中含有CRE序列的基因不參與db-cAMP對細胞增殖抑製的調節,即與CREB燐痠化及其相應的DNA結閤活性無相關性.
종암기인、억암기인급전록인자CREB(cAMP반응서렬결합단백)대CRE DNA서렬결합활성적상관성,대db-cAMP처리적소서C3H10T1/2전화세포증식억제작용진행료연구.실험결과표명,전화세포중PKA(단백격매A)활성현저저우정상세포,이PKC(단백격매C)활성칙현저고우정상세포.반점인적화Northern인적분석현시전화세포중c-myc화CaM(개조소)기인표체명현고우정상세포,이p53기인화Rb기인표체칙명현저우정상세포,저사차별여C3H10T1/2전화세포증식실공유관.전화세포경db-cAMP(1 mmol/L)처리후,세포증식수도명현억제,db-cAMP처리0.5 h후,전화세포중PKA활성편명현증강,PKC활성칙피현저억제,처리2 h후,c-myc화CaM기인표체하강,이p53화Rb기인표체칙증강,저사변화여cAMP억제C3H10T1/2전화세포증식유밀절련계.응효조체전영분석현시db-cAMP(1 mmol/L)처리단시간내,CREB대CRE DNA서렬무결합활성,12 h후개시출현교약적결합활성,24 h후재명현가강,표명재db-cAMP처리적조기,조공구중함유CRE서렬적기인불삼여db-cAMP대세포증식억제적조절,즉여CREB린산화급기상응적DNA결합활성무상관성.
