生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
1期
56-62
,共7页
罗文新%陈敏%程通%管宝全%李少伟%李少菁%张军%夏宁邵
囉文新%陳敏%程通%管寶全%李少偉%李少菁%張軍%夏寧邵
라문신%진민%정통%관보전%리소위%리소정%장군%하저소
绿色荧光蛋白%橙色荧光蛋白%突变型%荧光光谱%荧光强度
綠色熒光蛋白%橙色熒光蛋白%突變型%熒光光譜%熒光彊度
록색형광단백%등색형광단백%돌변형%형광광보%형광강도
最近报道了从大型多管水母中分离出新的gfp基因.经大肠杆菌表达并纯化出的绿色荧光蛋白(GFPxm)具有476nm的激发峰和496nm的发射峰,但是只能在低温下成熟的缺点限制了它的应用.这里进一步报道GFPxm的12种突变型.在大肠杆菌中的表达结果表明,有7种突变型在37℃条件下产生高的荧光强度.在25、32和37℃条件下表达6 h,GFPxm16、GFPxm18和GFPxm19的相对荧光强度均高于增强型绿色荧光蛋白(EGFP),而GFPxm16和GFPxm163在42℃高温表达时仍能保持高的荧光强度.这7种突变型中的4种在哺乳动物细胞中已获得良好表达.此外,有6种突变型的荧光光谱红移,目前所达到的最长激发峰为514nm、最长发射峰为525nm.另外有3种突变型具有包括紫外在内的两个激发峰,1种突变型只有单一的紫外激发峰.首次报道具有橙色荧光的突变型OFPxm,它的激发峰为509nm、发射峰为523nm.523nm属于黄绿色,但肉眼看到的蛋白为橙色.OFPxm在高温下可得到高水平表达且很好地成熟,但是因为低的量子产率而荧光强度相对较低.
最近報道瞭從大型多管水母中分離齣新的gfp基因.經大腸桿菌錶達併純化齣的綠色熒光蛋白(GFPxm)具有476nm的激髮峰和496nm的髮射峰,但是隻能在低溫下成熟的缺點限製瞭它的應用.這裏進一步報道GFPxm的12種突變型.在大腸桿菌中的錶達結果錶明,有7種突變型在37℃條件下產生高的熒光彊度.在25、32和37℃條件下錶達6 h,GFPxm16、GFPxm18和GFPxm19的相對熒光彊度均高于增彊型綠色熒光蛋白(EGFP),而GFPxm16和GFPxm163在42℃高溫錶達時仍能保持高的熒光彊度.這7種突變型中的4種在哺乳動物細胞中已穫得良好錶達.此外,有6種突變型的熒光光譜紅移,目前所達到的最長激髮峰為514nm、最長髮射峰為525nm.另外有3種突變型具有包括紫外在內的兩箇激髮峰,1種突變型隻有單一的紫外激髮峰.首次報道具有橙色熒光的突變型OFPxm,它的激髮峰為509nm、髮射峰為523nm.523nm屬于黃綠色,但肉眼看到的蛋白為橙色.OFPxm在高溫下可得到高水平錶達且很好地成熟,但是因為低的量子產率而熒光彊度相對較低.
최근보도료종대형다관수모중분리출신적gfp기인.경대장간균표체병순화출적록색형광단백(GFPxm)구유476nm적격발봉화496nm적발사봉,단시지능재저온하성숙적결점한제료타적응용.저리진일보보도GFPxm적12충돌변형.재대장간균중적표체결과표명,유7충돌변형재37℃조건하산생고적형광강도.재25、32화37℃조건하표체6 h,GFPxm16、GFPxm18화GFPxm19적상대형광강도균고우증강형록색형광단백(EGFP),이GFPxm16화GFPxm163재42℃고온표체시잉능보지고적형광강도.저7충돌변형중적4충재포유동물세포중이획득량호표체.차외,유6충돌변형적형광광보홍이,목전소체도적최장격발봉위514nm、최장발사봉위525nm.령외유3충돌변형구유포괄자외재내적량개격발봉,1충돌변형지유단일적자외격발봉.수차보도구유등색형광적돌변형OFPxm,타적격발봉위509nm、발사봉위523nm.523nm속우황록색,단육안간도적단백위등색.OFPxm재고온하가득도고수평표체차흔호지성숙,단시인위저적양자산솔이형광강도상대교저.
