鸡传染性支气管炎病毒的快速检测
계전염성지기관염병독적쾌속검측
PCR Method for the Rapid Detection of IBV
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2002年 5期 386-390 ,共5页

    刘思国%康丽娟%江国托%刘明春%孔宪刚%杨宏伟%刘忠贵%李从寿%宋春青%霍兰享%卢景良

    류사국%강려연%강국탁%류명춘%공헌강%양굉위%류충귀%리종수%송춘청%곽란향%로경량

    鸡传染性支气管炎病毒%RT-PCR%检测 鷄傳染性支氣管炎病毒%RT-PCR%檢測
    계전염성지기관염병독%RT-PCR%검측
    本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性PCR方法.通过对纯化后IBV核蛋白基因进行的直接PCR及套式PCR扩增表明,两次PCR产物的大小为0.7kb和0.5kb,与实际设计相符.而对照的NDV及IBDV的PCR扩增产物均为阴性.用IBV HB(华北)株感染SPF鸡后,应用我们所建立的PCR方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的IBV,在SPF鸡感染IBV后的21天仍然能够检测到IBV的基因组,Southern blot杂交试验证明了我们获得的PCR产物为IBV的核蛋白基因.对30份自然感染病料的检测表明,本实验所建立的PCR方法检测阳性数为15份,阳性率为50%(15/30);鸡胚接种检测的阳性数为17份,阳性率为56.7%(17/30);IFA检测的阳性数为11份,阳性率为36.7%(11/30).PVR检测法与鸡胚接种方法的阳性符合率为93.3%(14/15),统计学分析表明,P＞0.05,差异不显著,而PCR检测法与IFA的阳性符合率为60%(9/15).结果证明本实验所建立的PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点,适用于不同来源及不同血清型IBV的检测.
    본시험건립료일충쾌속검측계전염성지기관염병독적통용성PCR방법.통과대순화후IBV핵단백기인진행적직접PCR급투식PCR확증표명,량차PCR산물적대소위0.7kb화0.5kb,여실제설계상부.이대조적NDV급IBDV적PCR확증산물균위음성.용IBV HB(화북)주감염SPF계후,응용아문소건립적PCR방법거검측불동시기소채집적신장、기관、맹장편도체、폐장화간장중적IBV,재SPF계감염IBV후적21천잉연능구검측도IBV적기인조,Southern blot잡교시험증명료아문획득적PCR산물위IBV적핵단백기인.대30빈자연감염병료적검측표명,본실험소건립적PCR방법검측양성수위15빈,양성솔위50%(15/30);계배접충검측적양성수위17빈,양성솔위56.7%(17/30);IFA검측적양성수위11빈,양성솔위36.7%(11/30).PVR검측법여계배접충방법적양성부합솔위93.3%(14/15),통계학분석표명,P＞0.05,차이불현저,이PCR검측법여IFA적양성부합솔위60%(9/15).결과증명본실험소건립적PCR검측방법구유민감、특이、쾌속등특점,괄용우불동래원급불동혈청형IBV적검측.
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