生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2002年
5期
541-545
,共5页
修朝阳%周穗菁%俞璎%陈常庆
脩朝暘%週穗菁%俞瓔%陳常慶
수조양%주수정%유영%진상경
溴化氰降解%凝血酶加工%淋巴细胞测活%GST
溴化氰降解%凝血酶加工%淋巴細胞測活%GST
추화청강해%응혈매가공%림파세포측활%GST
利用基因工程表达的方法,在大肠杆菌中通过与GST蛋白融合的方式高效表达了胸腺素α1前体基因,随后经亲和层析和SP强阳离子树脂纯化相结合的方式,得到了胸腺素前体肽段31肽和N-端未经乙酰化修饰的28肽.融合蛋白表达量达到菌体总蛋白的35%～40%,样品肽的产量也达到了约200mg/L(肽/发酵液)的产量.经质谱测定,分子量分别为3366和3066.BalB/C小鼠脾脏淋巴细胞体外测活表明,所构建的GST-Tα1融合蛋白和纯化后的产物对于淋巴细胞具有比较明显的增殖作用,其中N-端未经乙酰化的28肽产物与31肽产物活性相近,均对淋巴细胞具有明显的刺激增殖作用.
利用基因工程錶達的方法,在大腸桿菌中通過與GST蛋白融閤的方式高效錶達瞭胸腺素α1前體基因,隨後經親和層析和SP彊暘離子樹脂純化相結閤的方式,得到瞭胸腺素前體肽段31肽和N-耑未經乙酰化脩飾的28肽.融閤蛋白錶達量達到菌體總蛋白的35%～40%,樣品肽的產量也達到瞭約200mg/L(肽/髮酵液)的產量.經質譜測定,分子量分彆為3366和3066.BalB/C小鼠脾髒淋巴細胞體外測活錶明,所構建的GST-Tα1融閤蛋白和純化後的產物對于淋巴細胞具有比較明顯的增殖作用,其中N-耑未經乙酰化的28肽產物與31肽產物活性相近,均對淋巴細胞具有明顯的刺激增殖作用.
이용기인공정표체적방법,재대장간균중통과여GST단백융합적방식고효표체료흉선소α1전체기인,수후경친화층석화SP강양리자수지순화상결합적방식,득도료흉선소전체태단31태화N-단미경을선화수식적28태.융합단백표체량체도균체총단백적35%～40%,양품태적산량야체도료약200mg/L(태/발효액)적산량.경질보측정,분자량분별위3366화3066.BalB/C소서비장림파세포체외측활표명,소구건적GST-Tα1융합단백화순화후적산물대우림파세포구유비교명현적증식작용,기중N-단미경을선화적28태산물여31태산물활성상근,균대림파세포구유명현적자격증식작용.
