微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2002年
3期
348-353
,共6页
王凡强%王正祥%邵蔚蓝%刘吉泉%徐成勇%诸葛健
王凡彊%王正祥%邵蔚藍%劉吉泉%徐成勇%諸葛健
왕범강%왕정상%소위람%류길천%서성용%제갈건
重组大肠杆菌%过氧化氢酶%纯化%性质
重組大腸桿菌%過氧化氫酶%純化%性質
중조대장간균%과양화경매%순화%성질
将产热稳定性过氧化氢酶的重组大肠杆菌培养后菌体破碎得到的粗酶液经热处理、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、HiPrep 16/10 Phenyl疏水作用层析、Su-Perdex200 HR 10/30凝胶层析提纯后得到电泳纯的酶,比酶活达到15629U/mg.此酶的最适温度为70℃,最适pH7.0,在60℃保温60min酶活力基本不变,在PH3～8的范围内比较稳定.此酶的Km和Vmax 分别为7.75mmol/L和27.8mnol@min-1@mg-1.1mmol/L的Zn2+、Ba2+、Mn2+可使该酶完全失活,KCN、NaN3、Na2S2O4、巯基乙醇对酶活力有抑制作用,50mmol/L的EDTA不影响酶活性.
將產熱穩定性過氧化氫酶的重組大腸桿菌培養後菌體破碎得到的粗酶液經熱處理、硫痠銨分級沉澱、DEAE-Sephadex A-50離子交換層析、HiPrep 16/10 Phenyl疏水作用層析、Su-Perdex200 HR 10/30凝膠層析提純後得到電泳純的酶,比酶活達到15629U/mg.此酶的最適溫度為70℃,最適pH7.0,在60℃保溫60min酶活力基本不變,在PH3～8的範圍內比較穩定.此酶的Km和Vmax 分彆為7.75mmol/L和27.8mnol@min-1@mg-1.1mmol/L的Zn2+、Ba2+、Mn2+可使該酶完全失活,KCN、NaN3、Na2S2O4、巰基乙醇對酶活力有抑製作用,50mmol/L的EDTA不影響酶活性.
장산열은정성과양화경매적중조대장간균배양후균체파쇄득도적조매액경열처리、류산안분급침정、DEAE-Sephadex A-50리자교환층석、HiPrep 16/10 Phenyl소수작용층석、Su-Perdex200 HR 10/30응효층석제순후득도전영순적매,비매활체도15629U/mg.차매적최괄온도위70℃,최괄pH7.0,재60℃보온60min매활력기본불변,재PH3～8적범위내비교은정.차매적Km화Vmax 분별위7.75mmol/L화27.8mnol@min-1@mg-1.1mmol/L적Zn2+、Ba2+、Mn2+가사해매완전실활,KCN、NaN3、Na2S2O4、구기을순대매활력유억제작용,50mmol/L적EDTA불영향매활성.
