农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2002年
2期
171-175
,共5页
朱成钢%金勇丰%史锋%金荣仲%吴玉澄%张耀洲
硃成鋼%金勇豐%史鋒%金榮仲%吳玉澄%張耀洲
주성강%금용봉%사봉%금영중%오옥징%장요주
家蚕%轻链基因%基因打靶载体%绿色荧光蛋白
傢蠶%輕鏈基因%基因打靶載體%綠色熒光蛋白
가잠%경련기인%기인타파재체%록색형광단백
家蚕(Bombyx mori)的丝心蛋白启动子是自然界中最强的启动子之一,若能使外源基因在丝心蛋白启动子控制下得到表达,将具有重要的意义.研究从蚕蛹中提取家蚕基因组DNA,用PCR的方法克隆了丝心蛋白轻链基因的5kb和0.5kb两个片段.DNA序列分析表明,不同蚕品种2～7外显子范围内DNA序列同源性达95.7%.用PCR的方法在GFP基因前端加上凝血酶的识别序列,并克隆到轻链基因的5 kb和0.5kb两个片段中间,使GFP基因具有正确的读码框,能和轻链蛋白融合表达.将这一融合的DNA大片段克隆到pBacPAK8转移载体上,构建成一种新型的转基因家蚕打靶载体pBacFL53TG,用于家蚕丝腺生物反应器的研究.
傢蠶(Bombyx mori)的絲心蛋白啟動子是自然界中最彊的啟動子之一,若能使外源基因在絲心蛋白啟動子控製下得到錶達,將具有重要的意義.研究從蠶蛹中提取傢蠶基因組DNA,用PCR的方法剋隆瞭絲心蛋白輕鏈基因的5kb和0.5kb兩箇片段.DNA序列分析錶明,不同蠶品種2～7外顯子範圍內DNA序列同源性達95.7%.用PCR的方法在GFP基因前耑加上凝血酶的識彆序列,併剋隆到輕鏈基因的5 kb和0.5kb兩箇片段中間,使GFP基因具有正確的讀碼框,能和輕鏈蛋白融閤錶達.將這一融閤的DNA大片段剋隆到pBacPAK8轉移載體上,構建成一種新型的轉基因傢蠶打靶載體pBacFL53TG,用于傢蠶絲腺生物反應器的研究.
가잠(Bombyx mori)적사심단백계동자시자연계중최강적계동자지일,약능사외원기인재사심단백계동자공제하득도표체,장구유중요적의의.연구종잠용중제취가잠기인조DNA,용PCR적방법극륭료사심단백경련기인적5kb화0.5kb량개편단.DNA서렬분석표명,불동잠품충2～7외현자범위내DNA서렬동원성체95.7%.용PCR적방법재GFP기인전단가상응혈매적식별서렬,병극륭도경련기인적5 kb화0.5kb량개편단중간,사GFP기인구유정학적독마광,능화경련단백융합표체.장저일융합적DNA대편단극륭도pBacPAK8전이재체상,구건성일충신형적전기인가잠타파재체pBacFL53TG,용우가잠사선생물반응기적연구.
