江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
6期
41-42
,共2页
董冰雪%李玉英%叶壮清%耿三春%李运会%宋雅菲%刘伟
董冰雪%李玉英%葉壯清%耿三春%李運會%宋雅菲%劉偉
동빙설%리옥영%협장청%경삼춘%리운회%송아비%류위
重组质粒%高通量筛选%一步裂解%DNA迁移速率%PCR
重組質粒%高通量篩選%一步裂解%DNA遷移速率%PCR
중조질립%고통량사선%일보렬해%DNA천이속솔%PCR
介绍了一种极其简单、快速、廉价、可靠的从cDNA文库或者转化平板上高通量筛选重组质粒的方法.将细菌培养液或者转化平板上的单菌落直接用1%SDS一步裂解,琼脂糖凝胶快速电泳,根据DNA迁移速率判断是否重组质粒.裂解上清液可以稀释后直接用作PCR模板,扩增出目的基因.利用这种方法可以在短短的几个小时内完成几百个重组质粒的筛选.
介紹瞭一種極其簡單、快速、廉價、可靠的從cDNA文庫或者轉化平闆上高通量篩選重組質粒的方法.將細菌培養液或者轉化平闆上的單菌落直接用1%SDS一步裂解,瓊脂糖凝膠快速電泳,根據DNA遷移速率判斷是否重組質粒.裂解上清液可以稀釋後直接用作PCR模闆,擴增齣目的基因.利用這種方法可以在短短的幾箇小時內完成幾百箇重組質粒的篩選.
개소료일충겁기간단、쾌속、렴개、가고적종cDNA문고혹자전화평판상고통량사선중조질립적방법.장세균배양액혹자전화평판상적단균락직접용1%SDS일보렬해,경지당응효쾌속전영,근거DNA천이속솔판단시부중조질립.렬해상청액가이희석후직접용작PCR모판,확증출목적기인.이용저충방법가이재단단적궤개소시내완성궤백개중조질립적사선.