CAJ | 학술논문

目的:观察自体骨髓间充质干细胞复合新型支架材料羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸修复兔膝关节软骨全层缺损.方法:实验于2005-03/08在兰州大学骨科研究所完成.①抽取兔骨髓液经过密度梯度离心得到单个核细胞,在经过体外分离培养获得骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞吸附于羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸复合材料上,再移植于兔膝关节全层软骨缺损模型处.②36只健康青紫兰兔被随机分成3组,每组各12只.细胞材料复合物组:将骨髓间充质干细胞与羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸复合物植入双侧股骨髁间窝软骨缺损处;单纯复合材料组:单纯植入羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸;空白对照组:不做任何植入.③分别于术后4,8,12周各处死4只兔子,取材进行大体、组织学及免疫组织化学染色观察.大体及组织学观察结果参照O'driscoll的评分标准进行评分.结果:36只兔全部进入结果分析.①培养细胞的生物学特性观察:原代培养骨髓细胞7～10 d后,多数细胞旋涡状排列.传代6 h后细胞开始贴壁,5～7 d铺满瓶壁.细胞形态均一呈梭形.②各组兔术后大体观察、股骨组织学检查:细胞材料复合物组术后12周大体评分明显低于单纯复合材料组和空白对照组(修复组织表面结构:0.45±0.25,1.15±0.25,2.47±0.39,P＜0.05;缺损填充深度:0.35±0.15,1.27±0.27,2.63±0.27,P＜0.05;与周围软骨结合情况:0.58±0.08,1.10±0.24,1.87±0.64,P＜0.05).细胞材料复合物组12周关节软骨表面光滑,光镜下可见已形成正常软骨厚度的软骨层及完整的软骨下骨,与对照组有明显差异.修复组织Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性,强度与周围正常软骨无差别.软骨缺损处为透明软骨修复.组织学评分各项(缺损填充深度、与周围软骨结合情况、修复组织表面结构、细胞形态、潮线形成、甲苯胺兰染色)评分均显著低于单纯复合材料组和空白对照组.③各组兔修复组织吸光度值形态分析:修复方法在基质分泌方面优势顺序为:细胞材料复合物组＞单纯复合材料组＞空白对照组.结论:自体骨髓间充质干细胞复合羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸材料以类透明样软骨组织完整修复缺损,是一种修复软骨缺损的行之有效的方法,羟基磷灰石/聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸可以做为组织工程软骨支架材料. 目的:觀察自體骨髓間充質榦細胞複閤新型支架材料羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠脩複兔膝關節軟骨全層缺損.方法:實驗于2005-03/08在蘭州大學骨科研究所完成.①抽取兔骨髓液經過密度梯度離心得到單箇覈細胞,在經過體外分離培養穫得骨髓間充質榦細胞,將骨髓間充質榦細胞吸附于羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠複閤材料上,再移植于兔膝關節全層軟骨缺損模型處.②36隻健康青紫蘭兔被隨機分成3組,每組各12隻.細胞材料複閤物組:將骨髓間充質榦細胞與羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠複閤物植入雙側股骨髁間窩軟骨缺損處;單純複閤材料組:單純植入羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠;空白對照組:不做任何植入.③分彆于術後4,8,12週各處死4隻兔子,取材進行大體、組織學及免疫組織化學染色觀察.大體及組織學觀察結果參照O'driscoll的評分標準進行評分.結果:36隻兔全部進入結果分析.①培養細胞的生物學特性觀察:原代培養骨髓細胞7～10 d後,多數細胞鏇渦狀排列.傳代6 h後細胞開始貼壁,5～7 d鋪滿瓶壁.細胞形態均一呈梭形.②各組兔術後大體觀察、股骨組織學檢查:細胞材料複閤物組術後12週大體評分明顯低于單純複閤材料組和空白對照組(脩複組織錶麵結構:0.45±0.25,1.15±0.25,2.47±0.39,P＜0.05;缺損填充深度:0.35±0.15,1.27±0.27,2.63±0.27,P＜0.05;與週圍軟骨結閤情況:0.58±0.08,1.10±0.24,1.87±0.64,P＜0.05).細胞材料複閤物組12週關節軟骨錶麵光滑,光鏡下可見已形成正常軟骨厚度的軟骨層及完整的軟骨下骨,與對照組有明顯差異.脩複組織Ⅱ型膠原免疫組織化學染色暘性,彊度與週圍正常軟骨無差彆.軟骨缺損處為透明軟骨脩複.組織學評分各項(缺損填充深度、與週圍軟骨結閤情況、脩複組織錶麵結構、細胞形態、潮線形成、甲苯胺蘭染色)評分均顯著低于單純複閤材料組和空白對照組.③各組兔脩複組織吸光度值形態分析:脩複方法在基質分泌方麵優勢順序為:細胞材料複閤物組＞單純複閤材料組＞空白對照組.結論:自體骨髓間充質榦細胞複閤羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠材料以類透明樣軟骨組織完整脩複缺損,是一種脩複軟骨缺損的行之有效的方法,羥基燐灰石/聚燐痠鈣纖維/左鏇聚乳痠可以做為組織工程軟骨支架材料.
목적:관찰자체골수간충질간세포복합신형지가재료간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산수복토슬관절연골전층결손.방법:실험우2005-03/08재란주대학골과연구소완성.①추취토골수액경과밀도제도리심득도단개핵세포,재경과체외분리배양획득골수간충질간세포,장골수간충질간세포흡부우간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산복합재료상,재이식우토슬관절전층연골결손모형처.②36지건강청자란토피수궤분성3조,매조각12지.세포재료복합물조:장골수간충질간세포여간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산복합물식입쌍측고골과간와연골결손처;단순복합재료조:단순식입간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산;공백대조조:불주임하식입.③분별우술후4,8,12주각처사4지토자,취재진행대체、조직학급면역조직화학염색관찰.대체급조직학관찰결과삼조O'driscoll적평분표준진행평분.결과:36지토전부진입결과분석.①배양세포적생물학특성관찰:원대배양골수세포7～10 d후,다수세포선와상배렬.전대6 h후세포개시첩벽,5～7 d포만병벽.세포형태균일정사형.②각조토술후대체관찰、고골조직학검사:세포재료복합물조술후12주대체평분명현저우단순복합재료조화공백대조조(수복조직표면결구:0.45±0.25,1.15±0.25,2.47±0.39,P＜0.05;결손전충심도:0.35±0.15,1.27±0.27,2.63±0.27,P＜0.05;여주위연골결합정황:0.58±0.08,1.10±0.24,1.87±0.64,P＜0.05).세포재료복합물조12주관절연골표면광활,광경하가견이형성정상연골후도적연골층급완정적연골하골,여대조조유명현차이.수복조직Ⅱ형효원면역조직화학염색양성,강도여주위정상연골무차별.연골결손처위투명연골수복.조직학평분각항(결손전충심도、여주위연골결합정황、수복조직표면결구、세포형태、조선형성、갑분알란염색)평분균현저저우단순복합재료조화공백대조조.③각조토수복조직흡광도치형태분석:수복방법재기질분비방면우세순서위:세포재료복합물조＞단순복합재료조＞공백대조조.결론:자체골수간충질간세포복합간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산재료이류투명양연골조직완정수복결손,시일충수복연골결손적행지유효적방법,간기린회석/취린산개섬유/좌선취유산가이주위조직공정연골지가재료.