大豆科学
大豆科學
대두과학
SOYBEAN SCIENCE
2012年
5期
808-812
,共5页
李宁%赵蕾%孙红炜%李凡%杨淑珂%路兴波
李寧%趙蕾%孫紅煒%李凡%楊淑珂%路興波
리저%조뢰%손홍위%리범%양숙가%로흥파
品系特异性%实时荧光定量PCR%转基因大豆
品繫特異性%實時熒光定量PCR%轉基因大豆
품계특이성%실시형광정량PCR%전기인대두
采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术,建立转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法.通过设计特异引物,扩增内标准基因lectin和BPS-CV127-9的5’侧翼序列,建立2种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性.结果表明,lectin基因和侧翼序列标准曲线线性关系良好,R2值分别为0.999和0.998,变异系数(CV) 1.50％～18.51％、标准偏差(SD)0.02 ～0.07.检测4个已知BPS-CV127-9含量(1％、0.5％、0.1％、0.05％)的转基因混合样品,实测值与实际值接近.该检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点,可以作为转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法.
採用SYBR Green實時熒光定量PCR技術,建立轉基因大豆BPS-CV127-9的定量檢測方法.通過設計特異引物,擴增內標準基因lectin和BPS-CV127-9的5’側翼序列,建立2種基因的拷貝數-CT標準麯線,根據標準麯線方程計算樣品中的轉基因含量,併且通過鎔解麯線分析擴增反應特異性.結果錶明,lectin基因和側翼序列標準麯線線性關繫良好,R2值分彆為0.999和0.998,變異繫數(CV) 1.50％～18.51％、標準偏差(SD)0.02 ～0.07.檢測4箇已知BPS-CV127-9含量(1％、0.5％、0.1％、0.05％)的轉基因混閤樣品,實測值與實際值接近.該檢測方法具有快速、靈敏、準確、特異、高通量等優點,可以作為轉基因大豆BPS-CV127-9的定量檢測方法.
채용SYBR Green실시형광정량PCR기술,건립전기인대두BPS-CV127-9적정량검측방법.통과설계특이인물,확증내표준기인lectin화BPS-CV127-9적5’측익서렬,건립2충기인적고패수-CT표준곡선,근거표준곡선방정계산양품중적전기인함량,병차통과용해곡선분석확증반응특이성.결과표명,lectin기인화측익서렬표준곡선선성관계량호,R2치분별위0.999화0.998,변이계수(CV) 1.50％～18.51％、표준편차(SD)0.02 ～0.07.검측4개이지BPS-CV127-9함량(1％、0.5％、0.1％、0.05％)적전기인혼합양품,실측치여실제치접근.해검측방법구유쾌속、령민、준학、특이、고통량등우점,가이작위전기인대두BPS-CV127-9적정량검측방법.
