北京交通大学学报
北京交通大學學報
북경교통대학학보
JOURNAL OF NORTHERN JIAOTONG UNIVERSITY
2009年
3期
99-102
,共4页
EGFRvⅢ基因%E33XI片段%原核表达%多克隆抗体%免疫组化
EGFRvⅢ基因%E33XI片段%原覈錶達%多剋隆抗體%免疫組化
EGFRvⅢ기인%E33XI편단%원핵표체%다극륭항체%면역조화
为了制备针对EGFRvⅢ的特异性多克隆抗体,在实验中利用耦联了血蓝蛋白的EGFRvⅢ特异性的PEP3合成短肽进行动物免疫,制备抗血清;构建了pET30a/E33XI原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白His-E33(EGFRvⅢ的部分胞外区);以此融合蛋白作为抗原制备了抗体纯化柱,通过柱上纯化的方法从抗血清中提取针对EGFRvⅢ的特异性抗体.利用U87、U251、HeLa和HEK-293细胞进行免疫组化实验来检验抗体的特异性.
為瞭製備針對EGFRvⅢ的特異性多剋隆抗體,在實驗中利用耦聯瞭血藍蛋白的EGFRvⅢ特異性的PEP3閤成短肽進行動物免疫,製備抗血清;構建瞭pET30a/E33XI原覈錶達載體,錶達和純化瞭融閤蛋白His-E33(EGFRvⅢ的部分胞外區);以此融閤蛋白作為抗原製備瞭抗體純化柱,通過柱上純化的方法從抗血清中提取針對EGFRvⅢ的特異性抗體.利用U87、U251、HeLa和HEK-293細胞進行免疫組化實驗來檢驗抗體的特異性.
위료제비침대EGFRvⅢ적특이성다극륭항체,재실험중이용우련료혈람단백적EGFRvⅢ특이성적PEP3합성단태진행동물면역,제비항혈청;구건료pET30a/E33XI원핵표체재체,표체화순화료융합단백His-E33(EGFRvⅢ적부분포외구);이차융합단백작위항원제비료항체순화주,통과주상순화적방법종항혈청중제취침대EGFRvⅢ적특이성항체.이용U87、U251、HeLa화HEK-293세포진행면역조화실험래검험항체적특이성.
