CAJ | 학술논문

目的建立流式细胞术(FCM)分析人骨髓巨核细胞的新方法 ,用于特发性血小板减少性紫癜(ITP)巨核细胞分化发育异常的初步研究.方法对15例正常骨髓供者(对照组)、37例ITP患者及11例继发性血小板减少症(ST)患者进行骨髓巨核细胞绝对计数;采用Percoll密度梯度分离法富集骨髓巨核细胞,经透膜处理后,用荧光素标记的单克隆抗体标记巨核细胞糖蛋白IIb/IIIa(CD41a)、血管性血友病因子(vWF)、P-选择素(CD62P),用碘化丙锭(PI)标记巨核细胞DNA,流式细胞术分析巨核细胞倍体分布和糖蛋白表达水平.结果对照、ITP和 ST三组之间比较,骨髓巨核细胞绝对数量无差异(P>0.05).富集后的骨髓标本,巨核细胞比例显著增高,可比富集前高17倍,而且DNA倍体(N)分布清晰,易于FCM分析设门和计算.与对照组比较,ITP患者巨核细胞DNA倍体分布未见明显改变,但CD41a表达量在2N、4N、8N、16N、32N、64N显著高于对照组(P＜0.01);vWF表达量在各倍体巨核细胞均减低,32N时减低更显著(P＜0.05);CD62P表达量在ITP组与对照和ST组间差异无显著性(P>0.05).结论在ITP患者骨髓巨核细胞的分化发育过程中,其数量和DNA倍体增加未受影响,但其功能蛋白合成出现显著变化.在不同倍体巨核细胞中,CD41a表达显著增高;而vWF呈现表达下降趋势,尤其是高倍体(32N)时减低更为显著;P-选择素表达水平稳定.多色流式细胞术分析骨髓巨核细胞为ITP的发病机制及其相关研究提供了新手段.
목적 건립류식세포술(FCM)분석인골수거핵세포적신방법 ,용우특발성혈소판감소성자전(ITP)거핵세포분화발육이상적초보연구.방법 대15례정상골수공자(대조조)、37례ITP환자급11례계발성혈소판감소증(ST)환자진행골수거핵세포절대계수;채용Percoll밀도제도분리법부집골수거핵세포,경투막처리후,용형광소표기적단극륭항체표기거핵세포당단백IIb/IIIa(CD41a)、혈관성혈우병인자(vWF)、P-선택소(CD62P),용전화병정(PI)표기거핵세포DNA,류식세포술분석거핵세포배체분포화당단백표체수평.결과 대조、ITP화 ST삼조지간비교,골수거핵세포절대수량무차이(P>0.05).부집후적골수표본,거핵세포비례현저증고,가비부집전고17배,이차DNA배체(N)분포청석,역우FCM분석설문화계산.여대조조비교,ITP환자거핵세포DNA배체분포미견명현개변,단CD41a표체량재2N、4N、8N、16N、32N、64N현저고우대조조(P＜0.01);vWF표체량재각배체거핵세포균감저,32N시감저경현저(P＜0.05);CD62P표체량재ITP조여대조화ST조간차이무현저성(P>0.05).결론 재ITP환자골수거핵세포적분화발육과정중,기수량화DNA배체증가미수영향,단기공능단백합성출현현저변화.재불동배체거핵세포중,CD41a표체현저증고;이vWF정현표체하강추세,우기시고배체(32N)시감저경위현저;P-선택소표체수평은정.다색류식세포술분석골수거핵세포위ITP적발병궤제급기상관연구제공료신수단.