重组人早孕因子的表达与纯化
중조인조잉인자적표체여순화
Prokaryotic Expression and Purification of Early Pregnancy Factor Protein
  • 万方数据
    中国农学通报 중국농학통보
    CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
    2011年 14期 40-44 ,共5页

    杜晓明%张改平%王丽%郭军庆%王林林%冯华%权凯%王爱萍

    두효명%장개평%왕려%곽군경%왕림림%풍화%권개%왕애평

    早孕因子%原核表达%重组蛋白 早孕因子%原覈錶達%重組蛋白
    조잉인자%원핵표체%중조단백
    早孕因子(EPF)是具有免疫抑制和生长调节活性的妊娠相关蛋白,为目前最早确认妊娠的生化指标之一.为获得人早孕因子重组蛋白,通过PCR技术扩增人早孕因子基因,克隆入原核表达载体pGEX-6p-1,与GST基因相融合,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以SDS-PAGE和Western b1ot分析重组蛋白的表达,通过GST树脂纯化表达蛋白.结果成功构建重组表达质粒pGEX6P-EPF,在大肠杆菌中诱导表达了GST-EPF融合蛋白,表达蛋白分子量为373 kDa,并能被抗GST单克隆抗体特异识别,GST亲和层析纯化,制备了EPF重组蛋白.
    조잉인자(EPF)시구유면역억제화생장조절활성적임신상관단백,위목전최조학인임신적생화지표지일.위획득인조잉인자중조단백,통과PCR기술확증인조잉인자기인,극륭입원핵표체재체pGEX-6p-1,여GST기인상융합,구건중조표체질립,전화대장간균표체균주BL21,경이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체,이SDS-PAGE화Western b1ot분석중조단백적표체,통과GST수지순화표체단백.결과성공구건중조표체질립pGEX6P-EPF,재대장간균중유도표체료GST-EPF융합단백,표체단백분자량위373 kDa,병능피항GST단극륭항체특이식별,GST친화층석순화,제비료EPF중조단백.
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