中国骨肿瘤骨病
中國骨腫瘤骨病
중국골종류골병
CHINESE JOURNAL OF BONE TUMOR AND BONE DISEASE
2011年
5期
518-521
,共4页
腺病毒%HIF-1α%脂肪源性干细胞%异位%软骨
腺病毒%HIF-1α%脂肪源性榦細胞%異位%軟骨
선병독%HIF-1α%지방원성간세포%이위%연골
目的 探讨重组腺病毒介导的低氧诱导因子-1α (HIF-1α)基因转染对脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)异位成软骨的作用.方法 构建能介导HIF-1α基因转染和表达的腺病毒载体(Ad-HIF-1α-GFP),转染体外培养的ASCs,RT-PCR检测其HIF-1α基因的表达,同时检测转染后细胞II型胶原的表达.随后将纤维蛋白胶分别与Ad-GFP-ASCs和Ad-HIF-1α-GFP-ASCs复合种植在裸鼠皮下,4周后行HE染色和甲苯胺蓝(Toluidine blue)染色进行观察.结果 荧光显微镜观察证实Ad-HIF-1α-GFP-ASCs的转染效率可达到80%;RT-PCR检测结果显示Ad-GFP-ASCs组微弱表达HIF-1α,Ad-HIF-1α-GFP-ASCs组HIF-1α基因则高表达,且Ad-HIF-1α-GFP-ASCs组II型胶原表达量明显高于Ad-GFP-ASCs组(P＜0.05);形态学染色表明Ad-HIF-1α-GFP转染的ASCs主要为圆形,细胞伸展比率较低,但细胞数目较多,且细胞分泌较多的蛋白多糖.结论 腺病毒介导的HIF-1α可诱导ASCs向软骨细胞分化.
目的 探討重組腺病毒介導的低氧誘導因子-1α (HIF-1α)基因轉染對脂肪源性榦細胞(adipose-derived stem cells,ASCs)異位成軟骨的作用.方法 構建能介導HIF-1α基因轉染和錶達的腺病毒載體(Ad-HIF-1α-GFP),轉染體外培養的ASCs,RT-PCR檢測其HIF-1α基因的錶達,同時檢測轉染後細胞II型膠原的錶達.隨後將纖維蛋白膠分彆與Ad-GFP-ASCs和Ad-HIF-1α-GFP-ASCs複閤種植在裸鼠皮下,4週後行HE染色和甲苯胺藍(Toluidine blue)染色進行觀察.結果 熒光顯微鏡觀察證實Ad-HIF-1α-GFP-ASCs的轉染效率可達到80%;RT-PCR檢測結果顯示Ad-GFP-ASCs組微弱錶達HIF-1α,Ad-HIF-1α-GFP-ASCs組HIF-1α基因則高錶達,且Ad-HIF-1α-GFP-ASCs組II型膠原錶達量明顯高于Ad-GFP-ASCs組(P＜0.05);形態學染色錶明Ad-HIF-1α-GFP轉染的ASCs主要為圓形,細胞伸展比率較低,但細胞數目較多,且細胞分泌較多的蛋白多糖.結論 腺病毒介導的HIF-1α可誘導ASCs嚮軟骨細胞分化.
목적 탐토중조선병독개도적저양유도인자-1α (HIF-1α)기인전염대지방원성간세포(adipose-derived stem cells,ASCs)이위성연골적작용.방법 구건능개도HIF-1α기인전염화표체적선병독재체(Ad-HIF-1α-GFP),전염체외배양적ASCs,RT-PCR검측기HIF-1α기인적표체,동시검측전염후세포II형효원적표체.수후장섬유단백효분별여Ad-GFP-ASCs화Ad-HIF-1α-GFP-ASCs복합충식재라서피하,4주후행HE염색화갑분알람(Toluidine blue)염색진행관찰.결과 형광현미경관찰증실Ad-HIF-1α-GFP-ASCs적전염효솔가체도80%;RT-PCR검측결과현시Ad-GFP-ASCs조미약표체HIF-1α,Ad-HIF-1α-GFP-ASCs조HIF-1α기인칙고표체,차Ad-HIF-1α-GFP-ASCs조II형효원표체량명현고우Ad-GFP-ASCs조(P＜0.05);형태학염색표명Ad-HIF-1α-GFP전염적ASCs주요위원형,세포신전비솔교저,단세포수목교다,차세포분비교다적단백다당.결론 선병독개도적HIF-1α가유도ASCs향연골세포분화.
