生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
1期
52-55
,共4页
孙宇%马玉媛%罗佳%章金刚
孫宇%馬玉媛%囉佳%章金剛
손우%마옥원%라가%장금강
RNA干扰%基因沉默%猪内源性反转录病毒
RNA榦擾%基因沉默%豬內源性反轉錄病毒
RNA간우%기인침묵%저내원성반전록병독
目的:尝试应用RNA干扰(RNAi)沉默猪源PK-15细胞中的猪内源性反转录病毒(PERV),并通过反转录酶活性及pol基因相对荧光定量PCR检测沉默效果.方法:依据GenBank公布的PERV pol基因序列,采用Invitrogen公司的BLOCK-iT RNAi Designer软件设计Stealth小干扰RNA (siRNA)序列；将合成的siRNA转染PK-15细胞,72 h后检测细胞上清PERV反转录酶活性及细胞内pol基因拷贝数并评价沉默效果.结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272～3296 bp的序列能有效沉默PERV.结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV沉默,为进一步研究天然抗病毒分子与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源异种移植研究中去除PERV提供了一种可供尝试的方法.
目的:嘗試應用RNA榦擾(RNAi)沉默豬源PK-15細胞中的豬內源性反轉錄病毒(PERV),併通過反轉錄酶活性及pol基因相對熒光定量PCR檢測沉默效果.方法:依據GenBank公佈的PERV pol基因序列,採用Invitrogen公司的BLOCK-iT RNAi Designer軟件設計Stealth小榦擾RNA (siRNA)序列；將閤成的siRNA轉染PK-15細胞,72 h後檢測細胞上清PERV反轉錄酶活性及細胞內pol基因拷貝數併評價沉默效果.結果:反轉錄酶活性及pol基因拷貝數檢測結果錶明,設計的3條Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272～3296 bp的序列能有效沉默PERV.結論:RNAi方法可有效使豬源PK-15細胞中的PERV沉默,為進一步研究天然抗病毒分子與PERV的相互作用提供瞭實驗基礎,同時也為豬源異種移植研究中去除PERV提供瞭一種可供嘗試的方法.
목적:상시응용RNA간우(RNAi)침묵저원PK-15세포중적저내원성반전록병독(PERV),병통과반전록매활성급pol기인상대형광정량PCR검측침묵효과.방법:의거GenBank공포적PERV pol기인서렬,채용Invitrogen공사적BLOCK-iT RNAi Designer연건설계Stealth소간우RNA (siRNA)서렬；장합성적siRNA전염PK-15세포,72 h후검측세포상청PERV반전록매활성급세포내pol기인고패수병평개침묵효과.결과:반전록매활성급pol기인고패수검측결과표명,설계적3조Stealth siRNA서렬중,위우pol기인3272～3296 bp적서렬능유효침묵PERV.결론:RNAi방법가유효사저원PK-15세포중적PERV침묵,위진일보연구천연항병독분자여PERV적상호작용제공료실험기출,동시야위저원이충이식연구중거제PERV제공료일충가공상시적방법.
