中国麻疹野病毒基因型快速诊断方法的建立
중국마진야병독기인형쾌속진단방법적건립
Establishment of a Rapid Dagnostic Method for Genotyping Measles Virus
  • 万方数据
    中国计划免疫 중국계화면역
    CHINESE JOURNAL OF VACCINES AND IMMUNIZATION
    2004年 6期 366-370 ,共5页

    周剑惠%陈超%刘桂艳%许强%张燕%朱贞%张运祥%田鑫%曹凤瑞%宋和%徐羽迪%王兆南%于瑞兰%徐力%中山哲夫%许文波

    주검혜%진초%류계염%허강%장연%주정%장운상%전흠%조봉서%송화%서우적%왕조남%우서란%서력%중산철부%허문파

    麻疹病毒%逆转录-聚合酶链反应%限制性内切酶片段长度多态性分析%电泳%序列分析%敏感性%特异性 痳疹病毒%逆轉錄-聚閤酶鏈反應%限製性內切酶片段長度多態性分析%電泳%序列分析%敏感性%特異性
    마진병독%역전록-취합매련반응%한제성내절매편단장도다태성분석%전영%서렬분석%민감성%특이성
    研究建立了一种适用于中国现流行麻疹野病毒基因型的基因型别筛查、定型的分析方法,即逆转录-聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP).首先对RT-PCR方法的敏感性和特异性进行了实验证明,对11株麻疹病毒提取核糖核酸(RNA),逆转录套式PCR扩增后全部出现阳性特异条带.在同样的反应条件下,扩增6种不同基因型麻疹病毒9株,同时又扩增其它非麻疹病毒.结果9株6种基因型麻疹病毒RT-PCR均呈现阳性条带,说明本研究采用的RT-PCR方法敏感.而非麻疹病毒RT-PCR结果为阴性,均未见阳性条带,说明该RT-PCR方法特异.根据H1和H2基因型麻疹病毒分别被不同的限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ切割成不同大小的基因片段,建立RFLP快速基因定型方法.之后,对建立的RFLP方法的特异性和敏感性进行了实验证明.利用该方法对吉林省连续两年分离到的9株麻疹野病毒[已经过中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家麻疹实验室脱氧核糖核酸(DNA)序列分析证实为H1基因型]进行验证,结果均为H1基因型麻疹病毒,证实该PCR-RFLP结果与序列分析结果一致,也说明该方法敏感.同时,又对7种不同基因型麻疹病毒应用PCR-RFLP方法进行实验,结果只有H1和H2基因型麻疹病毒被限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ分别切成2个不同大小的基因片段,其它基因型麻疹病毒由于无SalⅠ和BamHⅠ酶的切位点,所以未被切开,说明所建立的PCR-RFLP方法特异,只针对中国流行的麻疹病毒基因型.研究证明,RFLP是一种快速、简便又经济实用的麻疹病毒基因定型筛查方法.
    연구건립료일충괄용우중국현류행마진야병독기인형적기인형별사사、정형적분석방법,즉역전록-취합매련반응-한제성내절매편단장도다태성분석(RT-PCR-RFLP).수선대RT-PCR방법적민감성화특이성진행료실험증명,대11주마진병독제취핵당핵산(RNA),역전록투식PCR확증후전부출현양성특이조대.재동양적반응조건하,확증6충불동기인형마진병독9주,동시우확증기타비마진병독.결과9주6충기인형마진병독RT-PCR균정현양성조대,설명본연구채용적RT-PCR방법민감.이비마진병독RT-PCR결과위음성,균미견양성조대,설명해RT-PCR방법특이.근거H1화H2기인형마진병독분별피불동적한제성내절매SalⅠ화BamHⅠ절할성불동대소적기인편단,건립RFLP쾌속기인정형방법.지후,대건립적RFLP방법적특이성화민감성진행료실험증명.이용해방법대길림성련속량년분리도적9주마진야병독[이경과중국질병예방공제중심병독병예방공제소국가마진실험실탈양핵당핵산(DNA)서렬분석증실위H1기인형]진행험증,결과균위H1기인형마진병독,증실해PCR-RFLP결과여서렬분석결과일치,야설명해방법민감.동시,우대7충불동기인형마진병독응용PCR-RFLP방법진행실험,결과지유H1화H2기인형마진병독피한제성내절매SalⅠ화BamHⅠ분별절성2개불동대소적기인편단,기타기인형마진병독유우무SalⅠ화BamHⅠ매적절위점,소이미피절개,설명소건립적PCR-RFLP방법특이,지침대중국류행적마진병독기인형.연구증명,RFLP시일충쾌속、간편우경제실용적마진병독기인정형사사방법.
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