细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
3期
210-212
,共3页
贾雷立%马巍娜%宋宏彬%刘雪林%董世存%张传福%孙走南%钟彦伟
賈雷立%馬巍娜%宋宏彬%劉雪林%董世存%張傳福%孫走南%鐘彥偉
가뢰립%마외나%송굉빈%류설림%동세존%장전복%손주남%종언위
CR2%促衰变因子%补体%抑制物
CR2%促衰變因子%補體%抑製物
CR2%촉쇠변인자%보체%억제물
目的: 构建针对补体激活物的特异靶向补体抑制物, 并对其进行体外活性鉴定.方法: 将补体受体(CR2)与补体抑制物(促衰变因子, DAF)以融合表达方式(顺反结构)克隆到表达载体PBM中, 然后将重组体转移到CHO细胞中进行蛋白表达, 用SDS-PAGE、 Western blot、流式细胞术(FCM)检测、 SPR检测及补体介导的细胞溶解实验对表达的融合蛋白进行生物学活性鉴定.结果: SDS-PAGE和Western blot结果显示出现预期大小的目标片段.FCM与SPR检测结果显示, 重组蛋白CR2-DAF与DAF-CR2能特异地与C3包被的CHO细胞、 C3dg配基相结合.补体介导的细胞溶解实验结果显示, 靶向补体抑制物比相应的非靶向补体抑制物的抑制效果明显(CR2-DAF的抑制效率高达20倍).结论: 成功构建了CR2-DAF和DAF-CR2靶向补体抑制物, 为下一步进行动物体内补体抑制实验奠定了基础.
目的: 構建針對補體激活物的特異靶嚮補體抑製物, 併對其進行體外活性鑒定.方法: 將補體受體(CR2)與補體抑製物(促衰變因子, DAF)以融閤錶達方式(順反結構)剋隆到錶達載體PBM中, 然後將重組體轉移到CHO細胞中進行蛋白錶達, 用SDS-PAGE、 Western blot、流式細胞術(FCM)檢測、 SPR檢測及補體介導的細胞溶解實驗對錶達的融閤蛋白進行生物學活性鑒定.結果: SDS-PAGE和Western blot結果顯示齣現預期大小的目標片段.FCM與SPR檢測結果顯示, 重組蛋白CR2-DAF與DAF-CR2能特異地與C3包被的CHO細胞、 C3dg配基相結閤.補體介導的細胞溶解實驗結果顯示, 靶嚮補體抑製物比相應的非靶嚮補體抑製物的抑製效果明顯(CR2-DAF的抑製效率高達20倍).結論: 成功構建瞭CR2-DAF和DAF-CR2靶嚮補體抑製物, 為下一步進行動物體內補體抑製實驗奠定瞭基礎.
목적: 구건침대보체격활물적특이파향보체억제물, 병대기진행체외활성감정.방법: 장보체수체(CR2)여보체억제물(촉쇠변인자, DAF)이융합표체방식(순반결구)극륭도표체재체PBM중, 연후장중조체전이도CHO세포중진행단백표체, 용SDS-PAGE、 Western blot、류식세포술(FCM)검측、 SPR검측급보체개도적세포용해실험대표체적융합단백진행생물학활성감정.결과: SDS-PAGE화Western blot결과현시출현예기대소적목표편단.FCM여SPR검측결과현시, 중조단백CR2-DAF여DAF-CR2능특이지여C3포피적CHO세포、 C3dg배기상결합.보체개도적세포용해실험결과현시, 파향보체억제물비상응적비파향보체억제물적억제효과명현(CR2-DAF적억제효솔고체20배).결론: 성공구건료CR2-DAF화DAF-CR2파향보체억제물, 위하일보진행동물체내보체억제실험전정료기출.
