中国农业大学学报
中國農業大學學報
중국농업대학학보
JOURNAL OF CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
1期
6-10
,共5页
侯海燕%赵立红%乔健%金继昌%赵慧颖%胡永峰
侯海燕%趙立紅%喬健%金繼昌%趙慧穎%鬍永峰
후해연%조립홍%교건%금계창%조혜영%호영봉
鸡胚%肺泡上皮Ⅱ型细胞%原代培养%传代培养%细胞生长曲线%细胞鉴定
鷄胚%肺泡上皮Ⅱ型細胞%原代培養%傳代培養%細胞生長麯線%細胞鑒定
계배%폐포상피Ⅱ형세포%원대배양%전대배양%세포생장곡선%세포감정
为研究禽流感等敏感病毒及其他致病因子对肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC-Ⅱ)的致病性,建立了鸡AEC-Ⅱ细胞体外培养方法.采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶联合消化法时 18 日龄鸡胚肺组织进行消化,经差速离心和免疫黏附,获得了鸡 AEC-Ⅱ细胞,再经纯化、体外培养和碱性磷酸酶染色法鉴定.结果表明,鸡AEC-Ⅱ细胞在接种后18 h开始贴壁进入适应期,细胞为圆形,呈岛屿状生长;接种后 24～72 h,进入对教生长期,细胞为多边形,并融合成单层,胞浆内有明显的颗粒;接种后第 4 天细胞数量达到高峰(1.38 × 105个/mL),并进入稳定生长期,胞浆内颗粒开始减少;接种后6～7 d,细胞进入衰退期,胞浆内颗粒显著减少,细胞逐渐死亡、脱落.另外,4代(F4)之前的AEC-Ⅱ传代细胞贴壁时间早,形态均一,纯度高.说明接种后24～72 h内获得的AEC-Ⅱ原代细胞和F4之前的传代细胞可以供体外试验研究.
為研究禽流感等敏感病毒及其他緻病因子對肺泡上皮Ⅱ型細胞(AEC-Ⅱ)的緻病性,建立瞭鷄AEC-Ⅱ細胞體外培養方法.採用胰蛋白酶和Ⅳ型膠原酶聯閤消化法時 18 日齡鷄胚肺組織進行消化,經差速離心和免疫黏附,穫得瞭鷄 AEC-Ⅱ細胞,再經純化、體外培養和堿性燐痠酶染色法鑒定.結果錶明,鷄AEC-Ⅱ細胞在接種後18 h開始貼壁進入適應期,細胞為圓形,呈島嶼狀生長;接種後 24～72 h,進入對教生長期,細胞為多邊形,併融閤成單層,胞漿內有明顯的顆粒;接種後第 4 天細胞數量達到高峰(1.38 × 105箇/mL),併進入穩定生長期,胞漿內顆粒開始減少;接種後6～7 d,細胞進入衰退期,胞漿內顆粒顯著減少,細胞逐漸死亡、脫落.另外,4代(F4)之前的AEC-Ⅱ傳代細胞貼壁時間早,形態均一,純度高.說明接種後24～72 h內穫得的AEC-Ⅱ原代細胞和F4之前的傳代細胞可以供體外試驗研究.
위연구금류감등민감병독급기타치병인자대폐포상피Ⅱ형세포(AEC-Ⅱ)적치병성,건립료계AEC-Ⅱ세포체외배양방법.채용이단백매화Ⅳ형효원매연합소화법시 18 일령계배폐조직진행소화,경차속리심화면역점부,획득료계 AEC-Ⅱ세포,재경순화、체외배양화감성린산매염색법감정.결과표명,계AEC-Ⅱ세포재접충후18 h개시첩벽진입괄응기,세포위원형,정도서상생장;접충후 24～72 h,진입대교생장기,세포위다변형,병융합성단층,포장내유명현적과립;접충후제 4 천세포수량체도고봉(1.38 × 105개/mL),병진입은정생장기,포장내과립개시감소;접충후6～7 d,세포진입쇠퇴기,포장내과립현저감소,세포축점사망、탈락.령외,4대(F4)지전적AEC-Ⅱ전대세포첩벽시간조,형태균일,순도고.설명접충후24～72 h내획득적AEC-Ⅱ원대세포화F4지전적전대세포가이공체외시험연구.
