生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
4期
679-683
,共5页
PPDK%热玫瑰小双孢菌%大肠杆菌%焦测序
PPDK%熱玫瑰小雙孢菌%大腸桿菌%焦測序
PPDK%열매괴소쌍포균%대장간균%초측서
以热玫瑰小双孢菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了编码PPDK的基因,将此基因片段插入到表达载体pET28a(+)中构建得到了重组表达质粒pET28a(+)-PPDK,将重组表达质粒pET28a(+)-PPDK转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.经过IPTG诱导,重组菌成功表达了N端带有6-His Tag的重组PPDK.经SDS-PAGE分析,重组PPDK单体分子量为101 kD.经过镍亲和层析和超滤后,重组PPDK蛋白基本达到电泳纯,并被成功应用于焦测序中.
以熱玫瑰小雙孢菌基因組DNA為模闆,通過PCR擴增得到瞭編碼PPDK的基因,將此基因片段插入到錶達載體pET28a(+)中構建得到瞭重組錶達質粒pET28a(+)-PPDK,將重組錶達質粒pET28a(+)-PPDK轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中.經過IPTG誘導,重組菌成功錶達瞭N耑帶有6-His Tag的重組PPDK.經SDS-PAGE分析,重組PPDK單體分子量為101 kD.經過鎳親和層析和超濾後,重組PPDK蛋白基本達到電泳純,併被成功應用于焦測序中.
이열매괴소쌍포균기인조DNA위모판,통과PCR확증득도료편마PPDK적기인,장차기인편단삽입도표체재체pET28a(+)중구건득도료중조표체질립pET28a(+)-PPDK,장중조표체질립pET28a(+)-PPDK전화도대장간균BL21(DE3)중.경과IPTG유도,중조균성공표체료N단대유6-His Tag적중조PPDK.경SDS-PAGE분석,중조PPDK단체분자량위101 kD.경과얼친화층석화초려후,중조PPDK단백기본체도전영순,병피성공응용우초측서중.
