生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2008年
2期
172-179
,共8页
康楷%黄林%董晓静%朱园方%胡丽娜
康楷%黃林%董曉靜%硃園方%鬍麗娜
강해%황림%동효정%주완방%호려나
卵巢癌%多药耐药%逆转剂%凋亡%谷胱甘肽%Bcl-2
卵巢癌%多藥耐藥%逆轉劑%凋亡%穀胱甘肽%Bcl-2
란소암%다약내약%역전제%조망%곡광감태%Bcl-2
目的 在同一实验系统中比较Ru-486、MPA、VP、CsA对非P-g介导的卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP耐药性的逆转作用并对其作用机制进行探讨,为临床克服耐药提供参考依据.方法 采用MTT法从细胞代谢,DNA凝胶电泳从细胞凋亡方面系统观察比较DDP、Ru-486、MPA、VP、CsA 5种药物对卵巢癌多药耐药细胞系COC1/DDP的影响及相互关系,检测上述5种药物与COC1/DDP作用时细胞内GSH-ST和GSH-Px活性的变化,并采用westernblotting以Bcl-2抗体为分子探针对上述5种药物与COC1/DDP作用时细胞内Bcl-2基因的表达进行测定对其逆转机制进行探讨.结果 1)Ku-486、CsA、MPA对COC1/DDP有直接抑制作用,其抑制率随浓度增高进行性升高,、而VP对COC1/DD,P没有直接抑制作用.和DDP联用时,Ru-486、MPA、VP、CsA都能显著增强COC1/DDP对DDP的敏感性,达到一定浓度后,可以完全逆转COC1/DDP对DDP的耐药性.这种逆转是通过抑制细胞代谢、诱导细胞凋亡的结果.2)单纯2.5μg/ml的DDP能使GSH-Px及GST活力上升,除VP外,Ru-486等药物可降低GSH-Px和GST活力,与DDP联用时亦如此.提示,Ru-486、CsA、MPA可以通过抑制GSH转移酶系统阻止对细胞损伤的修复而达到对耐药性的逆转.3)单独的DDP、Ru-486等药物非但对Bcl-2的表达没有抑制作用,反而促进了其表达,以MPA最甚.与DDP联用时,却出现了一个有趣的现象,即可以抑制Bcl-2的表达,Ru-486与DDP联用时Bcl-2的表达几乎完全被阻截.结论 :VP、Ru-486、CsA和MPA对卵巢癌多药耐药细胞系COC1/DDP的耐药性有确切逆转作用.其逆转机制可能与降低GSH转移酶系统活性有关.当与DDP联用时可以通过降低Bcl-2蛋白表达来逆转耐药.
目的 在同一實驗繫統中比較Ru-486、MPA、VP、CsA對非P-g介導的卵巢癌耐順鉑細胞株COC1/DDP耐藥性的逆轉作用併對其作用機製進行探討,為臨床剋服耐藥提供參攷依據.方法 採用MTT法從細胞代謝,DNA凝膠電泳從細胞凋亡方麵繫統觀察比較DDP、Ru-486、MPA、VP、CsA 5種藥物對卵巢癌多藥耐藥細胞繫COC1/DDP的影響及相互關繫,檢測上述5種藥物與COC1/DDP作用時細胞內GSH-ST和GSH-Px活性的變化,併採用westernblotting以Bcl-2抗體為分子探針對上述5種藥物與COC1/DDP作用時細胞內Bcl-2基因的錶達進行測定對其逆轉機製進行探討.結果 1)Ku-486、CsA、MPA對COC1/DDP有直接抑製作用,其抑製率隨濃度增高進行性升高,、而VP對COC1/DD,P沒有直接抑製作用.和DDP聯用時,Ru-486、MPA、VP、CsA都能顯著增彊COC1/DDP對DDP的敏感性,達到一定濃度後,可以完全逆轉COC1/DDP對DDP的耐藥性.這種逆轉是通過抑製細胞代謝、誘導細胞凋亡的結果.2)單純2.5μg/ml的DDP能使GSH-Px及GST活力上升,除VP外,Ru-486等藥物可降低GSH-Px和GST活力,與DDP聯用時亦如此.提示,Ru-486、CsA、MPA可以通過抑製GSH轉移酶繫統阻止對細胞損傷的脩複而達到對耐藥性的逆轉.3)單獨的DDP、Ru-486等藥物非但對Bcl-2的錶達沒有抑製作用,反而促進瞭其錶達,以MPA最甚.與DDP聯用時,卻齣現瞭一箇有趣的現象,即可以抑製Bcl-2的錶達,Ru-486與DDP聯用時Bcl-2的錶達幾乎完全被阻截.結論 :VP、Ru-486、CsA和MPA對卵巢癌多藥耐藥細胞繫COC1/DDP的耐藥性有確切逆轉作用.其逆轉機製可能與降低GSH轉移酶繫統活性有關.噹與DDP聯用時可以通過降低Bcl-2蛋白錶達來逆轉耐藥.
목적 재동일실험계통중비교Ru-486、MPA、VP、CsA대비P-g개도적란소암내순박세포주COC1/DDP내약성적역전작용병대기작용궤제진행탐토,위림상극복내약제공삼고의거.방법 채용MTT법종세포대사,DNA응효전영종세포조망방면계통관찰비교DDP、Ru-486、MPA、VP、CsA 5충약물대란소암다약내약세포계COC1/DDP적영향급상호관계,검측상술5충약물여COC1/DDP작용시세포내GSH-ST화GSH-Px활성적변화,병채용westernblotting이Bcl-2항체위분자탐침대상술5충약물여COC1/DDP작용시세포내Bcl-2기인적표체진행측정대기역전궤제진행탐토.결과 1)Ku-486、CsA、MPA대COC1/DDP유직접억제작용,기억제솔수농도증고진행성승고,、이VP대COC1/DD,P몰유직접억제작용.화DDP련용시,Ru-486、MPA、VP、CsA도능현저증강COC1/DDP대DDP적민감성,체도일정농도후,가이완전역전COC1/DDP대DDP적내약성.저충역전시통과억제세포대사、유도세포조망적결과.2)단순2.5μg/ml적DDP능사GSH-Px급GST활력상승,제VP외,Ru-486등약물가강저GSH-Px화GST활력,여DDP련용시역여차.제시,Ru-486、CsA、MPA가이통과억제GSH전이매계통조지대세포손상적수복이체도대내약성적역전.3)단독적DDP、Ru-486등약물비단대Bcl-2적표체몰유억제작용,반이촉진료기표체,이MPA최심.여DDP련용시,각출현료일개유취적현상,즉가이억제Bcl-2적표체,Ru-486여DDP련용시Bcl-2적표체궤호완전피조절.결론 :VP、Ru-486、CsA화MPA대란소암다약내약세포계COC1/DDP적내약성유학절역전작용.기역전궤제가능여강저GSH전이매계통활성유관.당여DDP련용시가이통과강저Bcl-2단백표체래역전내약.
