CAJ | 학술논문

利用Leptin和ITS促进体外成熟和体外培养的牛卵母细胞的发育和质量,探讨提高胚胎体外生产的质量和数量的方法和技术.试验1:体外受精胚胎的培养液:添加BSA的KSOM中添加10 mL/L浓度的ITS,结果使胚胎的桑椹胚率和囊胚率显著(P＜0.05)高于培养液中不加ITS的对照组(桑椹胚率:43.48% vs 29.07%,囊胚率:22.83% vs 11.63%),卵裂率、正常分裂率和8细胞率与对照组差异不显著(P＞0.05).试验2:在卵母细胞的体外成熟液中添加10 μg/L具有生物学活性的重组鸡Leptin成熟肽融合蛋白,Leptin处理组和对照组卵母细胞经体外成熟、受精后转入加有10 mL/L ITS的KSOM培养液进行体外培养.试验组卵裂率和正常分裂率极显著(P＜0.01)高于对照组(88.96% vs 66.81% 和 61.11% vs 29.36%),8细胞率显著(P＜0.05)高于对照组(84.84% vs 69.57%).Leptin处理的卵母细胞在受精后的桑椹胚率和囊胚率与对照组差异不显著,但最后的囊胚数量较对照组增加1倍多,分别为IVF卵母细胞总数的14.8%和6.4% (P＜0.01).这说明,添加Leptin对牛卵母细胞体外成熟有促进作用,可显著提高卵母细胞受精后早期胚胎的卵裂率、正常分裂率和8细胞率;加入ITS则能提高桑椹胚率和囊胚率;而Leptin和ITS的按顺序结合使用,则能大大增加体外生产胚胎的桑椹胚和囊胚的数量,从而提高胚胎体外生产的效率.
이용Leptin화ITS촉진체외성숙화체외배양적우란모세포적발육화질량,탐토제고배태체외생산적질량화수량적방법화기술.시험1:체외수정배태적배양액:첨가BSA적KSOM중첨가10 mL/L농도적ITS,결과사배태적상심배솔화낭배솔현저(P＜0.05)고우배양액중불가ITS적대조조(상심배솔:43.48% vs 29.07%,낭배솔:22.83% vs 11.63%),란렬솔、정상분렬솔화8세포솔여대조조차이불현저(P＞0.05).시험2:재란모세포적체외성숙액중첨가10 μg/L구유생물학활성적중조계Leptin성숙태융합단백,Leptin처리조화대조조란모세포경체외성숙、수정후전입가유10 mL/L ITS적KSOM배양액진행체외배양.시험조란렬솔화정상분렬솔겁현저(P＜0.01)고우대조조(88.96% vs 66.81% 화 61.11% vs 29.36%),8세포솔현저(P＜0.05)고우대조조(84.84% vs 69.57%).Leptin처리적란모세포재수정후적상심배솔화낭배솔여대조조차이불현저,단최후적낭배수량교대조조증가1배다,분별위IVF란모세포총수적14.8%화6.4% (P＜0.01).저설명,첨가Leptin대우란모세포체외성숙유촉진작용,가현저제고란모세포수정후조기배태적란렬솔、정상분렬솔화8세포솔;가입ITS칙능제고상심배솔화낭배솔;이Leptin화ITS적안순서결합사용,칙능대대증가체외생산배태적상심배화낭배적수량,종이제고배태체외생산적효솔.