中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
9期
661-664,669
,共5页
余传信%殷旭仁%华万全%高琪
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环介导同温DNA扩增%血吸虫, 日本%感染性钉螺%鉴定
環介導同溫DNA擴增%血吸蟲, 日本%感染性釘螺%鑒定
배개도동온DNA확증%혈흡충, 일본%감염성정라%감정
目的 建立一种快速鉴定血吸虫感染性钉螺的环介导同温DNA扩增方法.方法 选择一个高拷贝的日本血吸虫基因SjR2的部分DNA序列作为扩增靶位,根据环介导同温DNA扩增原理设计合成引物,建立扩增该片段的环介导同温DNA扩增方法.使用此方法与聚合酶链反应(PCR)方法同时检测血吸虫感染性钉螺与正常钉螺的DNA,观察其应用价值.结果 日本血吸虫SjR2基因的839～1 138 bp区段被成功扩增和克隆.利用根据该片段DNA序列设计合成的环介导同温DNA扩增反应的引物,成功地建立了能扩增该片段的环介导同温DNA扩增方法,其敏感性高于PCR法,能检出1 pg的血吸虫DNA.用此法检测30只感染性钉螺,阳性率为93.33%,而PCR的阳性率83.33%,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 环介导同温DNA扩增检测血吸虫感染性钉螺具有较高的敏感性,是一种潜在有效的血吸虫感染性钉螺鉴定方法.
目的 建立一種快速鑒定血吸蟲感染性釘螺的環介導同溫DNA擴增方法.方法 選擇一箇高拷貝的日本血吸蟲基因SjR2的部分DNA序列作為擴增靶位,根據環介導同溫DNA擴增原理設計閤成引物,建立擴增該片段的環介導同溫DNA擴增方法.使用此方法與聚閤酶鏈反應(PCR)方法同時檢測血吸蟲感染性釘螺與正常釘螺的DNA,觀察其應用價值.結果 日本血吸蟲SjR2基因的839～1 138 bp區段被成功擴增和剋隆.利用根據該片段DNA序列設計閤成的環介導同溫DNA擴增反應的引物,成功地建立瞭能擴增該片段的環介導同溫DNA擴增方法,其敏感性高于PCR法,能檢齣1 pg的血吸蟲DNA.用此法檢測30隻感染性釘螺,暘性率為93.33%,而PCR的暘性率83.33%,兩者差異有統計學意義(P＜0.01).結論 環介導同溫DNA擴增檢測血吸蟲感染性釘螺具有較高的敏感性,是一種潛在有效的血吸蟲感染性釘螺鑒定方法.
목적 건립일충쾌속감정혈흡충감염성정라적배개도동온DNA확증방법.방법 선택일개고고패적일본혈흡충기인SjR2적부분DNA서렬작위확증파위,근거배개도동온DNA확증원리설계합성인물,건립확증해편단적배개도동온DNA확증방법.사용차방법여취합매련반응(PCR)방법동시검측혈흡충감염성정라여정상정라적DNA,관찰기응용개치.결과 일본혈흡충SjR2기인적839～1 138 bp구단피성공확증화극륭.이용근거해편단DNA서렬설계합성적배개도동온DNA확증반응적인물,성공지건립료능확증해편단적배개도동온DNA확증방법,기민감성고우PCR법,능검출1 pg적혈흡충DNA.용차법검측30지감염성정라,양성솔위93.33%,이PCR적양성솔83.33%,량자차이유통계학의의(P＜0.01).결론 배개도동온DNA확증검측혈흡충감염성정라구유교고적민감성,시일충잠재유효적혈흡충감염성정라감정방법.
