中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
2期
403-409
,共7页
周华蓉%沈建箴%付海英%沈松菲%范丽萍
週華蓉%瀋建箴%付海英%瀋鬆菲%範麗萍
주화용%침건잠%부해영%침송비%범려평
AS2O3%p16基因甲基化%恶性淋巴瘤%CA46细胞系%DNA甲基转移酶
AS2O3%p16基因甲基化%噁性淋巴瘤%CA46細胞繫%DNA甲基轉移酶
AS2O3%p16기인갑기화%악성림파류%CA46세포계%DNA갑기전이매
本研究旨在探讨三氧化二砷(AS2O3)逆转恶性淋巴瘤CA46细胞株p16基因甲基化状态和调节转录作用及其可能的机制.以高甲基化的恶性淋巴瘤细胞株CA46作为研究基因甲基化与表达关系的实验对象.采用SRB法检测AS2O3对人恶性淋巴瘤CA46细胞系增殖、活力的影响;nMSP法检测药物作用后p16甲基化状态变化;RT-PCR法检测p16、甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达;利用流式细胞术DNA倍体分析法探讨AS2O3,对恶性淋巴瘤细胞周期的影响.结果表明:①AS2O3作用CA46细胞株72小时后p16基因甲基化程度明显减弱,p16基因异常甲基化的现象被逆转;②未处理组细胞p16基因呈微弱表达,AS2O3作用72小时后p16基因表达增强,0.5 μmol/L组、1.0μmol/L组和2.0μmol/L组p16基因表达阳性条带与β-actin灰度的比值分别为(0.33±0.10)、(0.57±0.11)、(0.67±0.09),阳性对照灰度比值为(0.73±0.13),差异有统计学意义(p<0.01);③与未处理组相比,AS2O3作用72小时后甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B的表达下降并呈浓度依赖性,而DNMTI表达不受影响;④与对照组相比,3组不同浓度AS2O3均能明显抑制肿瘤细胞生长,G0/G1期细胞增加.结论:AS2O3可能通过抑制甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B或(和)直接逆转p16基因甲基化状态,使p16基因表达上调,并恢复其活性,从而实现其细胞周期调控功能,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制肿瘤细胞的增长.
本研究旨在探討三氧化二砷(AS2O3)逆轉噁性淋巴瘤CA46細胞株p16基因甲基化狀態和調節轉錄作用及其可能的機製.以高甲基化的噁性淋巴瘤細胞株CA46作為研究基因甲基化與錶達關繫的實驗對象.採用SRB法檢測AS2O3對人噁性淋巴瘤CA46細胞繫增殖、活力的影響;nMSP法檢測藥物作用後p16甲基化狀態變化;RT-PCR法檢測p16、甲基轉移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA的錶達;利用流式細胞術DNA倍體分析法探討AS2O3,對噁性淋巴瘤細胞週期的影響.結果錶明:①AS2O3作用CA46細胞株72小時後p16基因甲基化程度明顯減弱,p16基因異常甲基化的現象被逆轉;②未處理組細胞p16基因呈微弱錶達,AS2O3作用72小時後p16基因錶達增彊,0.5 μmol/L組、1.0μmol/L組和2.0μmol/L組p16基因錶達暘性條帶與β-actin灰度的比值分彆為(0.33±0.10)、(0.57±0.11)、(0.67±0.09),暘性對照灰度比值為(0.73±0.13),差異有統計學意義(p<0.01);③與未處理組相比,AS2O3作用72小時後甲基轉移酶DNMT3A、DNMT3B的錶達下降併呈濃度依賴性,而DNMTI錶達不受影響;④與對照組相比,3組不同濃度AS2O3均能明顯抑製腫瘤細胞生長,G0/G1期細胞增加.結論:AS2O3可能通過抑製甲基轉移酶DNMT3A、DNMT3B或(和)直接逆轉p16基因甲基化狀態,使p16基因錶達上調,併恢複其活性,從而實現其細胞週期調控功能,將細胞阻滯于G0/G1期,抑製腫瘤細胞的增長.
본연구지재탐토삼양화이신(AS2O3)역전악성림파류CA46세포주p16기인갑기화상태화조절전록작용급기가능적궤제.이고갑기화적악성림파류세포주CA46작위연구기인갑기화여표체관계적실험대상.채용SRB법검측AS2O3대인악성림파류CA46세포계증식、활력적영향;nMSP법검측약물작용후p16갑기화상태변화;RT-PCR법검측p16、갑기전이매DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA적표체;이용류식세포술DNA배체분석법탐토AS2O3,대악성림파류세포주기적영향.결과표명:①AS2O3작용CA46세포주72소시후p16기인갑기화정도명현감약,p16기인이상갑기화적현상피역전;②미처리조세포p16기인정미약표체,AS2O3작용72소시후p16기인표체증강,0.5 μmol/L조、1.0μmol/L조화2.0μmol/L조p16기인표체양성조대여β-actin회도적비치분별위(0.33±0.10)、(0.57±0.11)、(0.67±0.09),양성대조회도비치위(0.73±0.13),차이유통계학의의(p<0.01);③여미처리조상비,AS2O3작용72소시후갑기전이매DNMT3A、DNMT3B적표체하강병정농도의뢰성,이DNMTI표체불수영향;④여대조조상비,3조불동농도AS2O3균능명현억제종류세포생장,G0/G1기세포증가.결론:AS2O3가능통과억제갑기전이매DNMT3A、DNMT3B혹(화)직접역전p16기인갑기화상태,사p16기인표체상조,병회복기활성,종이실현기세포주기조공공능,장세포조체우G0/G1기,억제종류세포적증장.
