CAJ | 학술논문

目的研究RNA干扰对系统性硬化病(SS)皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平的影响.方法设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA(siRNA)及一个非特异性siRNA.体外转录获得siRNA,将siRNA用6-羧基荧光素(FAM)标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞;转染48 h后,以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化.结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGF mRNA水平均有不同程度下调(P＜0.001),抑制效果由强至弱为,siRNA742＞siRNA828＞siRNA578＞siRNA948.蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调(P＜0.001),其中siRNA742的抑制效应最强.结论RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达.
목적연구RNA간우대계통성경화병(SS)피부성섬유세포결체조직생장인자(CTGF)mRNA화단백표체수평적영향.방법설계4개침대CTGF적특이성소간우RNA(siRNA)급일개비특이성siRNA.체외전록획득siRNA,장siRNA용6-최기형광소(FAM)표기후순시전염지원대배양적SS환자피부성섬유세포;전염48 h후,이RT-PCR급단백인적법분별검측CTGFmRNA급단백량적변화.결과전염료4개특이성siRNA적성섬유세포중CTGF mRNA수평균유불동정도하조(P＜0.001),억제효과유강지약위,siRNA742＞siRNA828＞siRNA578＞siRNA948.단백인적칙현시유3개siRNA능사CTGF단백표체수평불동정도하조(P＜0.001),기중siRNA742적억제효응최강.결론RNA간우능현저억제SS성섬유세포CTGF적표체.