山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2007年
5期
393-397
,共5页
金婧%包新华%潘虹%张玉稚%吴希如
金婧%包新華%潘虹%張玉稚%吳希如
금청%포신화%반홍%장옥치%오희여
RNA干扰%MeCP2%小发夹状RNA%慢病毒载体%大鼠
RNA榦擾%MeCP2%小髮夾狀RNA%慢病毒載體%大鼠
RNA간우%MeCP2%소발협상RNA%만병독재체%대서
目的 构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能.方法 设计针对大鼠MeCP2 mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化.用菌落PCR法、酶切及DNA测序鉴定重组克隆.结果 重组克隆经菌落PCR及酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确.结论 两个大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下了基础.
目的 構建併鑒定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒錶達載體,以便應用RNAi技術進一步研究MeCP2功能.方法 設計針對大鼠MeCP2 mRNA靶序列的小髮夾狀RNA,化學閤成含莖環結構的正義鏈與反義鏈,退火形成雙鏈後,與酶切後的pLentiLox3.7載體片段進行連接、轉化.用菌落PCR法、酶切及DNA測序鑒定重組剋隆.結果 重組剋隆經菌落PCR及酶切證實shRNA正確插入慢病毒載體,DNA測序證實插入的序列正確.結論 兩箇大鼠MeCP2-shRNA慢病毒錶達載體的成功構建為應用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下瞭基礎.
목적 구건병감정대서MeCP2-shRNA만병독표체재체,이편응용RNAi기술진일보연구MeCP2공능.방법 설계침대대서MeCP2 mRNA파서렬적소발협상RNA,화학합성함경배결구적정의련여반의련,퇴화형성쌍련후,여매절후적pLentiLox3.7재체편단진행련접、전화.용균락PCR법、매절급DNA측서감정중조극륭.결과 중조극륭경균락PCR급매절증실shRNA정학삽입만병독재체,DNA측서증실삽입적서렬정학.결론 량개대서MeCP2-shRNA만병독표체재체적성공구건위응용RNAi연구대서MeCP2공능타하료기출.
