北京农学院学报
北京農學院學報
북경농학원학보
JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
2008年
4期
37-40
,共4页
王霞泰%汤世坤%周双海%刘凤华
王霞泰%湯世坤%週雙海%劉鳳華
왕하태%탕세곤%주쌍해%류봉화
猪%IL-18%竞争定量PCR
豬%IL-18%競爭定量PCR
저%IL-18%경쟁정량PCR
根据GenBank中猪白介素(IL)-18基因序列,设计1对引物,用RT-PCR技术从猪肺泡巨噬细胞总RNA中扩增出其411 bp eDNA片段,将其与pGEM-T Easy载体连接,经转化、筛选阳性克隆、酶切与测序鉴定后,构建出含猪IL-18 cDNA部分片段的重组质粒.后用反向PCR技术构建出与扩增411 bp片段共用同1对引物,但缺失174 bp的竞争重组质粒.通过上述2种质粒的竞争PCR方法,建立了猪IL-18 mRNA的标准竞争曲线,得到其直线回归方程y=0.583 2 x-2.903 4(R2=0.9898).
根據GenBank中豬白介素(IL)-18基因序列,設計1對引物,用RT-PCR技術從豬肺泡巨噬細胞總RNA中擴增齣其411 bp eDNA片段,將其與pGEM-T Easy載體連接,經轉化、篩選暘性剋隆、酶切與測序鑒定後,構建齣含豬IL-18 cDNA部分片段的重組質粒.後用反嚮PCR技術構建齣與擴增411 bp片段共用同1對引物,但缺失174 bp的競爭重組質粒.通過上述2種質粒的競爭PCR方法,建立瞭豬IL-18 mRNA的標準競爭麯線,得到其直線迴歸方程y=0.583 2 x-2.903 4(R2=0.9898).
근거GenBank중저백개소(IL)-18기인서렬,설계1대인물,용RT-PCR기술종저폐포거서세포총RNA중확증출기411 bp eDNA편단,장기여pGEM-T Easy재체련접,경전화、사선양성극륭、매절여측서감정후,구건출함저IL-18 cDNA부분편단적중조질립.후용반향PCR기술구건출여확증411 bp편단공용동1대인물,단결실174 bp적경쟁중조질립.통과상술2충질립적경쟁PCR방법,건립료저IL-18 mRNA적표준경쟁곡선,득도기직선회귀방정y=0.583 2 x-2.903 4(R2=0.9898).
