检验检疫学刊
檢驗檢疫學刊
검험검역학간
INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE
2009年
1期
5-10
,共6页
许建明%段向英%张念之%蒋一男%张利峰
許建明%段嚮英%張唸之%蔣一男%張利峰
허건명%단향영%장념지%장일남%장리봉
IHNV%VHSV%SVCV%Taqman MGB探针%三重实时荧光RT-PCR
IHNV%VHSV%SVCV%Taqman MGB探針%三重實時熒光RT-PCR
IHNV%VHSV%SVCV%Taqman MGB탐침%삼중실시형광RT-PCR
鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒.通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的TaqmanMGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记.以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法.通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量.同时.该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测.实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法.
魚傳染性造血器官壞死病病毒(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、魚病毒性齣血性敗血癥病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鯉春病毒血癥病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同屬彈狀病毒科(Rhabdoviridae)的3種魚類病毒,也是影響水產養殖業的3種重要病毒.通過對這3種病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守區域,設計瞭3條分彆針對這3種病毒的TaqmanMGB探針,併選擇3種無相互榦擾的熒光基糰進行標記.以此為基礎建立針對該3種病毒的三重實時熒光RT-PCR的檢測方法.通過反應條件的優化,該三重實時熒光RT-PCR最低可檢測至102拷貝/反應的病毒量.同時.該方法還對病毒混閤感染EPC細胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑馬魚進行瞭檢測.實驗結果錶明,該方法是一種特異、靈敏、高效的病毒檢測方法.
어전염성조혈기관배사병병독(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、어병독성출혈성패혈증병독(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)화리춘병독혈증병독(Spring viraemia of carp virus SVCV)시동속탄상병독과(Rhabdoviridae)적3충어류병독,야시영향수산양식업적3충중요병독.통과대저3충병독기인서렬적분석,재병독기인적고보수구역,설계료3조분별침대저3충병독적TaqmanMGB탐침,병선택3충무상호간우적형광기단진행표기.이차위기출건립침대해3충병독적삼중실시형광RT-PCR적검측방법.통과반응조건적우화,해삼중실시형광RT-PCR최저가검측지102고패/반응적병독량.동시.해방법환대병독혼합감염EPC세포(Epithelioma papulosum cyprini)화공독반마어진행료검측.실험결과표명,해방법시일충특이、령민、고효적병독검측방법.
