现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2010年
7期
1279-1282
,共4页
党军强%周衍亮%王梓年%杨雁灵%刘卫辉%陈勇
黨軍彊%週衍亮%王梓年%楊雁靈%劉衛輝%陳勇
당군강%주연량%왕재년%양안령%류위휘%진용
蛋白质组学%多维液相色谱,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱%匀浆化
蛋白質組學%多維液相色譜,基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜%勻漿化
단백질조학%다유액상색보,기질보조격광해흡전리비행시간질보%균장화
目的:通过不同匀浆化方法提取大鼠胰腺组织总蛋白,建立胰腺组织匀浆化的标准方法.方法:用液氮研磨分别配合反复冻融法、超声破碎法进行高速分散器分别配合反复冻融法、超声破碎法进行匀浆化胰腺组织,总蛋白提取试剂盒提取胰腺组织总蛋白,测量蛋白浓度并用体积排阻色谱(SEC)分离后分别进行基质辅助激光电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)做蛋白全谱.结果:液氮研磨分别配合反复冻融法、超声破碎法,高速分散器分别配合反复冻融法、超声破碎法总蛋白提取量分别为每0.1g胰腺组织:(6.7±0.5)mg、(6.9±0.2)mg、(5.4±0.2)mg、(5.6±0.2)mg,MALDI-TOF-MS蛋白全谱的谱峰数分别为304.2±22.3、331.6±30.5、263.8±19.7、289.8±12.2个.结论:液氮研磨配合超声破碎法与其他3种方法相比具有匀浆化彻底、蛋白不易变性等优点.
目的:通過不同勻漿化方法提取大鼠胰腺組織總蛋白,建立胰腺組織勻漿化的標準方法.方法:用液氮研磨分彆配閤反複凍融法、超聲破碎法進行高速分散器分彆配閤反複凍融法、超聲破碎法進行勻漿化胰腺組織,總蛋白提取試劑盒提取胰腺組織總蛋白,測量蛋白濃度併用體積排阻色譜(SEC)分離後分彆進行基質輔助激光電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)做蛋白全譜.結果:液氮研磨分彆配閤反複凍融法、超聲破碎法,高速分散器分彆配閤反複凍融法、超聲破碎法總蛋白提取量分彆為每0.1g胰腺組織:(6.7±0.5)mg、(6.9±0.2)mg、(5.4±0.2)mg、(5.6±0.2)mg,MALDI-TOF-MS蛋白全譜的譜峰數分彆為304.2±22.3、331.6±30.5、263.8±19.7、289.8±12.2箇.結論:液氮研磨配閤超聲破碎法與其他3種方法相比具有勻漿化徹底、蛋白不易變性等優點.
목적:통과불동균장화방법제취대서이선조직총단백,건립이선조직균장화적표준방법.방법:용액담연마분별배합반복동융법、초성파쇄법진행고속분산기분별배합반복동융법、초성파쇄법진행균장화이선조직,총단백제취시제합제취이선조직총단백,측량단백농도병용체적배조색보(SEC)분리후분별진행기질보조격광전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)주단백전보.결과:액담연마분별배합반복동융법、초성파쇄법,고속분산기분별배합반복동융법、초성파쇄법총단백제취량분별위매0.1g이선조직:(6.7±0.5)mg、(6.9±0.2)mg、(5.4±0.2)mg、(5.6±0.2)mg,MALDI-TOF-MS단백전보적보봉수분별위304.2±22.3、331.6±30.5、263.8±19.7、289.8±12.2개.결론:액담연마배합초성파쇄법여기타3충방법상비구유균장화철저、단백불역변성등우점.
