内蒙古农业大学学报（自然科学版）
內矇古農業大學學報（自然科學版）
내몽고농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF INNER MONGOLIA AGRICULTURAL UNIIVERSITY
2011年
4期
14-18
,共5页
刘霄卉%于立新%刘畅%周建华%马学恩
劉霄卉%于立新%劉暢%週建華%馬學恩
류소훼%우립신%류창%주건화%마학은
ras基因%第一、二外显子%克隆%序列分析
ras基因%第一、二外顯子%剋隆%序列分析
ras기인%제일、이외현자%극륭%서렬분석
对JSRV感染羊及健康绵羊H-ras、N-ras、K-ras基因第一、二外显子区克隆并测序,研究其变异状况.方法:本研究从JSRV感染羊及健康绵羊肺组织中提取基因组DNA,应用PCR技术扩增Hras、Nras、Kras基因第一、二外显子序列,并通过T-A克隆的方法将其克隆入pMD - 18T载体中,鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定分析.结果:与其他物种ras基因相比,所克隆的ras基因与其他物种之间的差异率较小,基本保守,且与牛的ras基因同源性最高.所克隆的H -ras、K-ras基因在第一、二外显子区域序列完全相同；N-ras第81位氨基酸A-V的不同；但试验中检测的2例JSRV感染羊与健康绵羊的ras无论是在核酸水平上,还是在氨基酸水平上均未发现突变.结论:克隆测序了绵羊ras基因第一、二外显子,为下一步实验奠定了基础.
對JSRV感染羊及健康綿羊H-ras、N-ras、K-ras基因第一、二外顯子區剋隆併測序,研究其變異狀況.方法:本研究從JSRV感染羊及健康綿羊肺組織中提取基因組DNA,應用PCR技術擴增Hras、Nras、Kras基因第一、二外顯子序列,併通過T-A剋隆的方法將其剋隆入pMD - 18T載體中,鑒定為暘性的重組質粒進行序列測定分析.結果:與其他物種ras基因相比,所剋隆的ras基因與其他物種之間的差異率較小,基本保守,且與牛的ras基因同源性最高.所剋隆的H -ras、K-ras基因在第一、二外顯子區域序列完全相同；N-ras第81位氨基痠A-V的不同；但試驗中檢測的2例JSRV感染羊與健康綿羊的ras無論是在覈痠水平上,還是在氨基痠水平上均未髮現突變.結論:剋隆測序瞭綿羊ras基因第一、二外顯子,為下一步實驗奠定瞭基礎.
대JSRV감염양급건강면양H-ras、N-ras、K-ras기인제일、이외현자구극륭병측서,연구기변이상황.방법:본연구종JSRV감염양급건강면양폐조직중제취기인조DNA,응용PCR기술확증Hras、Nras、Kras기인제일、이외현자서렬,병통과T-A극륭적방법장기극륭입pMD - 18T재체중,감정위양성적중조질립진행서렬측정분석.결과:여기타물충ras기인상비,소극륭적ras기인여기타물충지간적차이솔교소,기본보수,차여우적ras기인동원성최고.소극륭적H -ras、K-ras기인재제일、이외현자구역서렬완전상동；N-ras제81위안기산A-V적불동；단시험중검측적2례JSRV감염양여건강면양적ras무론시재핵산수평상,환시재안기산수평상균미발현돌변.결론:극륭측서료면양ras기인제일、이외현자,위하일보실험전정료기출.
