中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2012年
8期
1111-1115
,共5页
李静%王涛%沈玉君%方圣云%沈玉先
李靜%王濤%瀋玉君%方聖雲%瀋玉先
리정%왕도%침옥군%방골운%침옥선
MANF%tau%冈田酸%阿尔采末病%神经保护%细胞活性
MANF%tau%岡田痠%阿爾採末病%神經保護%細胞活性
MANF%tau%강전산%아이채말병%신경보호%세포활성
目的 观察MANF是否可以抑制冈田酸诱导的N2a细胞中tau蛋白的过度磷酸化,以了解MANF神经保护作用的机制.方法 采用体外培养小鼠神经母瘤细胞株N2a,以冈田酸(okadaic aicd,OA)作为诱导剂诱导N2a细胞中tau蛋白过度磷酸化,在加入重组人MANF蛋白干预或转染MANF过表达质粒及siRNA后,用MTT法检测细胞增殖活性的变化,并用AT-8抗体检测tau蛋白ser202/Thr205位点的磷酸化水平变化.结果 N2a细胞在加入重组人MANF蛋白预处理4 h后加入OA诱导24 h后,经Western blot和MTT法检测发现,重组人MANF蛋白能明显抑制N2a细胞中tau蛋白的过度磷酸化,并可促进N2a细胞的增殖活性;在转染MANF过表达质粒后,N2a细胞中 OA诱导的过度磷酸化tau蛋白减少,且细胞活性增加;与此相反,转染siRNA下调内源性的MANF的表达则能促进N2a细胞中的tau蛋白过度磷酸化,并抑制细胞活性.结论 MANF可以抑制神经细胞中tau蛋白过度磷酸化,这可能是其发挥神经保护作用的原因之一.
目的 觀察MANF是否可以抑製岡田痠誘導的N2a細胞中tau蛋白的過度燐痠化,以瞭解MANF神經保護作用的機製.方法 採用體外培養小鼠神經母瘤細胞株N2a,以岡田痠(okadaic aicd,OA)作為誘導劑誘導N2a細胞中tau蛋白過度燐痠化,在加入重組人MANF蛋白榦預或轉染MANF過錶達質粒及siRNA後,用MTT法檢測細胞增殖活性的變化,併用AT-8抗體檢測tau蛋白ser202/Thr205位點的燐痠化水平變化.結果 N2a細胞在加入重組人MANF蛋白預處理4 h後加入OA誘導24 h後,經Western blot和MTT法檢測髮現,重組人MANF蛋白能明顯抑製N2a細胞中tau蛋白的過度燐痠化,併可促進N2a細胞的增殖活性;在轉染MANF過錶達質粒後,N2a細胞中 OA誘導的過度燐痠化tau蛋白減少,且細胞活性增加;與此相反,轉染siRNA下調內源性的MANF的錶達則能促進N2a細胞中的tau蛋白過度燐痠化,併抑製細胞活性.結論 MANF可以抑製神經細胞中tau蛋白過度燐痠化,這可能是其髮揮神經保護作用的原因之一.
목적 관찰MANF시부가이억제강전산유도적N2a세포중tau단백적과도린산화,이료해MANF신경보호작용적궤제.방법 채용체외배양소서신경모류세포주N2a,이강전산(okadaic aicd,OA)작위유도제유도N2a세포중tau단백과도린산화,재가입중조인MANF단백간예혹전염MANF과표체질립급siRNA후,용MTT법검측세포증식활성적변화,병용AT-8항체검측tau단백ser202/Thr205위점적린산화수평변화.결과 N2a세포재가입중조인MANF단백예처리4 h후가입OA유도24 h후,경Western blot화MTT법검측발현,중조인MANF단백능명현억제N2a세포중tau단백적과도린산화,병가촉진N2a세포적증식활성;재전염MANF과표체질립후,N2a세포중 OA유도적과도린산화tau단백감소,차세포활성증가;여차상반,전염siRNA하조내원성적MANF적표체칙능촉진N2a세포중적tau단백과도린산화,병억제세포활성.결론 MANF가이억제신경세포중tau단백과도린산화,저가능시기발휘신경보호작용적원인지일.
