CAJ | 학술논문

目的研究K562冻融抗原负载的健康供者来源的树突状细胞(DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤慢性粒细胞白血病(CML)细胞的毒性效应.方法利用健康供者外周血单个核细胞诱导分化为DC,采用反复冻融法从K562中提取的可溶性相关抗原负载DC;流式细胞学检测负载抗原前后DC表面分子表达的变化;ELISA法检测DC上清中IL-12和IFNγ的含量;混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC体外刺激T细胞增殖的能力;乳酸脱氢酶法检测K562冻融抗原负载DC诱导的抗原特异性CTL对CML细胞的杀伤作用.结果与未经抗原负载的DC相比,经K562抗原负载的DC表面分子表达明显上调,CD1a(27.40 ±5.00)%、(15.40±2.34)%, CD80(61.35±5.35)%、(42.00±2.77)%,CD83(93.30±3.48)%、(25.15±4.02)%, CD86(85.25±4.39)%、(37.25±3.20)%,CD40(89.80±7.18)%、(35.95±4.06)%,HLA-DR (49.50 ±5.45)%、(17.15±3.61)%,DC分泌IL-12和诱导T细胞分泌IFNγ的能力增加(P＜0.05),具有很强的刺激T细胞增殖能力,且刺激强度在24 h 最强,48 h 降低,冻融抗原负载DC后激活的CTL在体外对K562的杀伤率为77.35%,显著高于未经抗原负载的DC(P=0.001).结论经K562细胞冻融抗原负载DC激活的CTL在体外具有更强的增殖能力和杀伤CML细胞的作用.
목적 연구K562동융항원부재적건강공자래원적수돌상세포(DC)유도세포독성T림파세포(CTL)체외살상만성립세포백혈병(CML)세포적독성효응.방법 이용건강공자외주혈단개핵세포유도분화위DC,채용반복동융법종K562중제취적가용성상관항원부재DC;류식세포학검측부재항원전후DC표면분자표체적변화;ELISA법검측DC상청중IL-12화IFNγ적함량;혼합림파세포반응(MLR)측정DC체외자격T세포증식적능력;유산탈경매법검측K562동융항원부재DC유도적항원특이성CTL대CML세포적살상작용.결과 여미경항원부재적DC상비,경K562항원부재적DC표면분자표체명현상조,CD1a(27.40 ±5.00)%、(15.40±2.34)%, CD80(61.35±5.35)%、(42.00±2.77)%,CD83(93.30±3.48)%、(25.15±4.02)%, CD86(85.25±4.39)%、(37.25±3.20)%,CD40(89.80±7.18)%、(35.95±4.06)%,HLA-DR (49.50 ±5.45)%、(17.15±3.61)%,DC분비IL-12화유도T세포분비IFNγ적능력증가(P＜0.05),구유흔강적자격T세포증식능력,차자격강도재24 h 최강,48 h 강저,동융항원부재DC후격활적CTL재체외대K562적살상솔위77.35%,현저고우미경항원부재적DC(P=0.001).결론 경K562세포동융항원부재DC격활적CTL재체외구유경강적증식능력화살상CML세포적작용.