中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2002年
1期
46-53
,共8页
王敦成%沈倍奋%马淑华%王升启
王敦成%瀋倍奮%馬淑華%王升啟
왕돈성%침배강%마숙화%왕승계
红细胞分化%凝胶阻滞电泳%红系特异的转录因子%细胞因子受体%基因芯片
紅細胞分化%凝膠阻滯電泳%紅繫特異的轉錄因子%細胞因子受體%基因芯片
홍세포분화%응효조체전영%홍계특이적전록인자%세포인자수체%기인심편
以往报道了通过基因转染技术观察新的红细胞分化相关因子(EDRF1)反义RNA表达和EDRF1过表达对细胞增殖和分化的影响, 结果表明, 反义EDRF1表达载体转染后的K562细胞α- globin, γ-globin mRNA表达水平下降. 本文利用基因芯片和真核基因转染技术观察了EDRF1对60种细胞因子及其受体表达水平的影响, 发现EDRF1明显调节IL-6受体, GM-CSF受体, c-Jun/c-Fos, c-myc及c-kit(SCF受体)等基因的表达水平, 并通过RNA点杂交进行验证, EDRF1对几个重要的细胞因子受体表达的调节可能是其执行功能的一个重要途径. Northern blot实验结果表明, GATA-1 mRNA在转染EDRF1反义表达载体后表达水平有所下调, 随后的凝胶阻滞电泳实验(gel shift assay, EMSA)证明, 与对照相比, EDRF1反义表达载体转染的K562细胞中, 红系特异的转录因子GATA-1的活性受到明显的抑制, 而另一个红系特异的转录因子NF-E2则没有明显的活性改变, 对照NF-?B的转录活性也基本保持恒定. 因此推测, K562细胞增殖和分化的调节很可能是通过直接影响红系特异的转录因子GATA-1与顺式序列相互作用的转录活性来实现的.
以往報道瞭通過基因轉染技術觀察新的紅細胞分化相關因子(EDRF1)反義RNA錶達和EDRF1過錶達對細胞增殖和分化的影響, 結果錶明, 反義EDRF1錶達載體轉染後的K562細胞α- globin, γ-globin mRNA錶達水平下降. 本文利用基因芯片和真覈基因轉染技術觀察瞭EDRF1對60種細胞因子及其受體錶達水平的影響, 髮現EDRF1明顯調節IL-6受體, GM-CSF受體, c-Jun/c-Fos, c-myc及c-kit(SCF受體)等基因的錶達水平, 併通過RNA點雜交進行驗證, EDRF1對幾箇重要的細胞因子受體錶達的調節可能是其執行功能的一箇重要途徑. Northern blot實驗結果錶明, GATA-1 mRNA在轉染EDRF1反義錶達載體後錶達水平有所下調, 隨後的凝膠阻滯電泳實驗(gel shift assay, EMSA)證明, 與對照相比, EDRF1反義錶達載體轉染的K562細胞中, 紅繫特異的轉錄因子GATA-1的活性受到明顯的抑製, 而另一箇紅繫特異的轉錄因子NF-E2則沒有明顯的活性改變, 對照NF-?B的轉錄活性也基本保持恆定. 因此推測, K562細胞增殖和分化的調節很可能是通過直接影響紅繫特異的轉錄因子GATA-1與順式序列相互作用的轉錄活性來實現的.
이왕보도료통과기인전염기술관찰신적홍세포분화상관인자(EDRF1)반의RNA표체화EDRF1과표체대세포증식화분화적영향, 결과표명, 반의EDRF1표체재체전염후적K562세포α- globin, γ-globin mRNA표체수평하강. 본문이용기인심편화진핵기인전염기술관찰료EDRF1대60충세포인자급기수체표체수평적영향, 발현EDRF1명현조절IL-6수체, GM-CSF수체, c-Jun/c-Fos, c-myc급c-kit(SCF수체)등기인적표체수평, 병통과RNA점잡교진행험증, EDRF1대궤개중요적세포인자수체표체적조절가능시기집행공능적일개중요도경. Northern blot실험결과표명, GATA-1 mRNA재전염EDRF1반의표체재체후표체수평유소하조, 수후적응효조체전영실험(gel shift assay, EMSA)증명, 여대조상비, EDRF1반의표체재체전염적K562세포중, 홍계특이적전록인자GATA-1적활성수도명현적억제, 이령일개홍계특이적전록인자NF-E2칙몰유명현적활성개변, 대조NF-?B적전록활성야기본보지항정. 인차추측, K562세포증식화분화적조절흔가능시통과직접영향홍계특이적전록인자GATA-1여순식서렬상호작용적전록활성래실현적.