CAJ | 학술논문

背景与目的:建立可以同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变的多色荧光原位杂交技术.材料与方法:使用2条1号染色体探针(着丝粒和末端探针),2条18号染色体着丝粒探针,分别用地高辛或生物素标记,与人精子核DNA进行荧光原位杂交,用CY3-链亲和素检测生物素探针杂交信号;用与FITC结合的抗地高辛抗体检测地高辛信号,结果:在Nikon荧光显微镜下,可以清楚看到精子头部呈现兰色的荧光信号背景下,有红色荧光点信号(1号染色体着丝粒),绿色荧光信号(1号染色体末端),和黄色荧光信号(18号染色体着丝粒部位红、绿两种荧光信号的混合色).本方法能够同时检测到精子1号,18号染色体非整倍体率(双体率,缺体率),1号染色体短臂和着丝粒结构畸变(重复率,缺失率),以及二倍体精子率3种染色体异常.用建立的方法检测14名正常人135 937条精子,测得1号染色体双体率、缺体率分别为0.045%和0.048%;18号染色双体率、缺体率分别为0.053%和0.045%;二倍体精子率为0.061%;1号染色体末端重复率、缺失率分别为0.082%、0.069%,1号着丝粒重复率、缺失率分别为0.075%,0.060%;均在文献报道范围内.结论:本研究建立的多色FISH可用于测定正常人和环境化学物接触人群精子染色体数目畸变和结构畸变.
배경여목적:건립가이동시검측인정자염색체수목기변화결구기변적다색형광원위잡교기술.재료여방법:사용2조1호염색체탐침(착사립화말단탐침),2조18호염색체착사립탐침,분별용지고신혹생물소표기,여인정자핵DNA진행형광원위잡교,용CY3-련친화소검측생물소탐침잡교신호;용여FITC결합적항지고신항체검측지고신신호,결과:재Nikon형광현미경하,가이청초간도정자두부정현란색적형광신호배경하,유홍색형광점신호(1호염색체착사립),록색형광신호(1호염색체말단),화황색형광신호(18호염색체착사립부위홍、록량충형광신호적혼합색).본방법능구동시검측도정자1호,18호염색체비정배체솔(쌍체솔,결체솔),1호염색체단비화착사립결구기변(중복솔,결실솔),이급이배체정자솔3충염색체이상.용건립적방법검측14명정상인135 937조정자,측득1호염색체쌍체솔、결체솔분별위0.045%화0.048%;18호염색쌍체솔、결체솔분별위0.053%화0.045%;이배체정자솔위0.061%;1호염색체말단중복솔、결실솔분별위0.082%、0.069%,1호착사립중복솔、결실솔분별위0.075%,0.060%;균재문헌보도범위내.결론:본연구건립적다색FISH가용우측정정상인화배경화학물접촉인군정자염색체수목기변화결구기변.