生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
5期
699-703
,共5页
贺宇飞%张桂梅%王小红%张慧%袁野%李东%冯作化
賀宇飛%張桂梅%王小紅%張慧%袁野%李東%馮作化
하우비%장계매%왕소홍%장혜%원야%리동%풍작화
PD-1%可溶性受体%真核表达%质粒载体
PD-1%可溶性受體%真覈錶達%質粒載體
PD-1%가용성수체%진핵표체%질립재체
PD-L/PD-1是参与肿瘤免疫逃避的一条抑制性信号途径.为了用可溶性的PD-1受体阻断PD-L-PD-1的相互作用,将小鼠PD-1胞外段(aal-aa167)作为独立可溶性分子进行了真核表达,并对其功能进行鉴定.构建了编码小鼠PD-1胞外段cDNA(sPD-1)的真核质粒表达载体pPD-1A和编码sPD-1-GFP重组蛋白的真核质粒表达载体pPD-1B;细胞转染实验表明其表达产物主要是分泌到细胞外的可溶性产物(sPD-1),流式细胞仪检测表明sPD-1可有效结合PD-1配体;肿瘤细胞杀伤实验表明,sPD-1作用于肿瘤细胞或在脾淋巴细胞激活过程中作用于淋巴细胞,均可增强Hsp70-H22抗原肽复合物激活的脾淋巴细胞杀伤肿瘤细胞的作用.sPD-1真核表达载体的构建为在肿瘤局部表达抑制性共刺激分子的可溶性受体,拮抗肿瘤微环境中负调节因素对T细胞的抑制作用,增强机体的抗肿瘤能力,提供了一种新的肿瘤基因治疗手段.
PD-L/PD-1是參與腫瘤免疫逃避的一條抑製性信號途徑.為瞭用可溶性的PD-1受體阻斷PD-L-PD-1的相互作用,將小鼠PD-1胞外段(aal-aa167)作為獨立可溶性分子進行瞭真覈錶達,併對其功能進行鑒定.構建瞭編碼小鼠PD-1胞外段cDNA(sPD-1)的真覈質粒錶達載體pPD-1A和編碼sPD-1-GFP重組蛋白的真覈質粒錶達載體pPD-1B;細胞轉染實驗錶明其錶達產物主要是分泌到細胞外的可溶性產物(sPD-1),流式細胞儀檢測錶明sPD-1可有效結閤PD-1配體;腫瘤細胞殺傷實驗錶明,sPD-1作用于腫瘤細胞或在脾淋巴細胞激活過程中作用于淋巴細胞,均可增彊Hsp70-H22抗原肽複閤物激活的脾淋巴細胞殺傷腫瘤細胞的作用.sPD-1真覈錶達載體的構建為在腫瘤跼部錶達抑製性共刺激分子的可溶性受體,拮抗腫瘤微環境中負調節因素對T細胞的抑製作用,增彊機體的抗腫瘤能力,提供瞭一種新的腫瘤基因治療手段.
PD-L/PD-1시삼여종류면역도피적일조억제성신호도경.위료용가용성적PD-1수체조단PD-L-PD-1적상호작용,장소서PD-1포외단(aal-aa167)작위독립가용성분자진행료진핵표체,병대기공능진행감정.구건료편마소서PD-1포외단cDNA(sPD-1)적진핵질립표체재체pPD-1A화편마sPD-1-GFP중조단백적진핵질립표체재체pPD-1B;세포전염실험표명기표체산물주요시분비도세포외적가용성산물(sPD-1),류식세포의검측표명sPD-1가유효결합PD-1배체;종류세포살상실험표명,sPD-1작용우종류세포혹재비림파세포격활과정중작용우림파세포,균가증강Hsp70-H22항원태복합물격활적비림파세포살상종류세포적작용.sPD-1진핵표체재체적구건위재종류국부표체억제성공자격분자적가용성수체,길항종류미배경중부조절인소대T세포적억제작용,증강궤체적항종류능력,제공료일충신적종류기인치료수단.
