武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
2期
193-196
,共4页
尹素改%芦宝静%王汉中%杨继红
尹素改%蘆寶靜%王漢中%楊繼紅
윤소개%호보정%왕한중%양계홍
B组轮状病毒%nsp2基因%克隆%蛋白表达%抗体制备
B組輪狀病毒%nsp2基因%剋隆%蛋白錶達%抗體製備
B조륜상병독%nsp2기인%극륭%단백표체%항체제비
根据B组轮状病毒(GBRV)WH-1株nsp2基因的全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到nsp2基因的编码区.将其片段克隆到原核表达载体pGEX-KG上,经IPTG诱导,在E.coli DH5α菌株中得到高效表达.表达的GST融合蛋白大小为61×103,经SDS-PAGE分离纯化,免疫小白鼠制备了多克隆抗体.抗体经1∶3 000倍稀释后用于Western Blot分析,获得特异性显色信号.所表达的蛋白和制备的抗体可用于蛋白结构和功能的进一步研究.
根據B組輪狀病毒(GBRV)WH-1株nsp2基因的全序列,設計引物,用PCR的方法擴增得到nsp2基因的編碼區.將其片段剋隆到原覈錶達載體pGEX-KG上,經IPTG誘導,在E.coli DH5α菌株中得到高效錶達.錶達的GST融閤蛋白大小為61×103,經SDS-PAGE分離純化,免疫小白鼠製備瞭多剋隆抗體.抗體經1∶3 000倍稀釋後用于Western Blot分析,穫得特異性顯色信號.所錶達的蛋白和製備的抗體可用于蛋白結構和功能的進一步研究.
근거B조륜상병독(GBRV)WH-1주nsp2기인적전서렬,설계인물,용PCR적방법확증득도nsp2기인적편마구.장기편단극륭도원핵표체재체pGEX-KG상,경IPTG유도,재E.coli DH5α균주중득도고효표체.표체적GST융합단백대소위61×103,경SDS-PAGE분리순화,면역소백서제비료다극륭항체.항체경1∶3 000배희석후용우Western Blot분석,획득특이성현색신호.소표체적단백화제비적항체가용우단백결구화공능적진일보연구.
