CAJ | 학술논문

经DEAE-52,Q-Sepharose和Sephacry S-200柱厌氧层析,从在含Cr的培养基中生长良好的棕色固氮菌突变株UW3纯化得到CrFe蛋白制备物.与从野生型固氮菌OP的MoFe蛋白(OP Av1)相比,该制备物中～50%的蛋白具有与之相似的亚基组成,并可与OP Av1的抗体发生免疫交叉反应.该制备物还具有～40%的OP Av1 C2H2,H+和N2(以在氩气和氮气下放氢的差值表示)还原活性,并具与OP Av1相似的电子对比率.金属分析表明,此蛋白制备物含有Fe,Cr和Mo.与OP Av1相比,该制备物在450nm的圆二色谱(CD)与之相似,但在3个相同g值处(g≈4.3,3.7和2.0)出现的EPR信号相对强度则不相同.根据EPR计算的结果表明,(i)CrFe蛋白制备物的Mo/Cr和Fe/(Cr+Mo)的比率分别为0.4和15.0,暗示在该制备物中的含Cr蛋白与MoFe蛋白之比约为2.5;(ii)该制备物活性与Fe及Cr的比率都分别接近于OP Av1活性与Fe和与Mo的比率;(iii)该制备物的上述3个g处的EPR信号强度与Cr含量的比率分别为OpAv1信号强度与Mo含量之比的～83%,0%和～40%.以上结果表明,CrFe蛋白也许是一种新的固氮酶组分Ⅰ蛋白,除以Cr代替Mo外,它的功能和包括金属原子簇在内的结构都可能与MoFe相似.
경DEAE-52,Q-Sepharose화Sephacry S-200주염양층석,종재함Cr적배양기중생장량호적종색고담균돌변주UW3순화득도CrFe단백제비물.여종야생형고담균OP적MoFe단백(OP Av1)상비,해제비물중～50%적단백구유여지상사적아기조성,병가여OP Av1적항체발생면역교차반응.해제비물환구유～40%적OP Av1 C2H2,H+화N2(이재아기화담기하방경적차치표시)환원활성,병구여OP Av1상사적전자대비솔.금속분석표명,차단백제비물함유Fe,Cr화Mo.여OP Av1상비,해제비물재450nm적원이색보(CD)여지상사,단재3개상동g치처(g≈4.3,3.7화2.0)출현적EPR신호상대강도칙불상동.근거EPR계산적결과표명,(i)CrFe단백제비물적Mo/Cr화Fe/(Cr+Mo)적비솔분별위0.4화15.0,암시재해제비물중적함Cr단백여MoFe단백지비약위2.5;(ii)해제비물활성여Fe급Cr적비솔도분별접근우OP Av1활성여Fe화여Mo적비솔;(iii)해제비물적상술3개g처적EPR신호강도여Cr함량적비솔분별위OpAv1신호강도여Mo함량지비적～83%,0%화～40%.이상결과표명,CrFe단백야허시일충신적고담매조분Ⅰ단백,제이Cr대체Mo외,타적공능화포괄금속원자족재내적결구도가능여MoFe상사.