CAJ | 학술논문

[目的]寻找镰形扇头蜱吸血后较吸血前唾液腺差异表达基因.[方法]以抑制消减杂交法分别构建镰形扇头蜱半饱血雌蜱和吸血雄蜱唾液腺以pGEM-T-easy为载体的cDNA文库,并测序进行生物信息学分析.[结果]分别测得247个雌蜱有效EST序列和168个雄蜱有效EST序列,并预测雌蜱可能含有5'末端和3'末端的EST序列分别为25个和44个,雄蜱可能含有5'末端和3'末端EST序列分别为53个和74个.随机选择非重复的24个雌蜱序列和21个雄蜱序列以RT-PCR方法验证消减效果;在吸血后唾液腺中,雌蜱有13个基因表达上调或新表达,消减效率为54%,雄蜱有9个基因表达上调或新表达,消减效率为43%.对所测有效序列经BLAST分析,检索247个雌蜱序列获得141个匹配,匹配率为57%,其中有32个蜱基因,占141个匹配基因的23%;检索168个雄蜱序列获得125个匹配,匹配率为74%,其中有29个蜱基因,占125个匹配基因的23%.BLAST检索结果显示这些蛋白主要包括帮助蜱口器固定免疫调节蛋白、抗凝血蛋白、加强能量代谢的线粒体蛋白和促进基因转录的各种转录因子.[结论]这些蛋白主要是为了适应蜱吸血的生理过程及应变蜱因吸血而产生的免疫防御和排斥.
[목적]심조렴형선두비흡혈후교흡혈전타액선차이표체기인.[방법]이억제소감잡교법분별구건렴형선두비반포혈자비화흡혈웅비타액선이pGEM-T-easy위재체적cDNA문고,병측서진행생물신식학분석.[결과]분별측득247개자비유효EST서렬화168개웅비유효EST서렬,병예측자비가능함유5'말단화3'말단적EST서렬분별위25개화44개,웅비가능함유5'말단화3'말단EST서렬분별위53개화74개.수궤선택비중복적24개자비서렬화21개웅비서렬이RT-PCR방법험증소감효과;재흡혈후타액선중,자비유13개기인표체상조혹신표체,소감효솔위54%,웅비유9개기인표체상조혹신표체,소감효솔위43%.대소측유효서렬경BLAST분석,검색247개자비서렬획득141개필배,필배솔위57%,기중유32개비기인,점141개필배기인적23%;검색168개웅비서렬획득125개필배,필배솔위74%,기중유29개비기인,점125개필배기인적23%.BLAST검색결과현시저사단백주요포괄방조비구기고정면역조절단백、항응혈단백、가강능량대사적선립체단백화촉진기인전록적각충전록인자.[결론]저사단백주요시위료괄응비흡혈적생리과정급응변비인흡혈이산생적면역방어화배척.