利用免疫共沉淀验证HT036与P311间的相互作用
이용면역공침정험증HT036여P311간적상호작용
Identification of interaction between HT036 and P311 by co-immunoprecipitation
  • 万方数据
    第三军医大学学报 제삼군의대학학보
    ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
    2006年 24期 2400-2402 ,共3页

    袁顺宗%彭旭%马兵%王庆红%易绍萱%贺伟峰%陈希炜%胡晓红%张小容%周丽娜%罗高兴%吴军

    원순종%팽욱%마병%왕경홍%역소훤%하위봉%진희위%호효홍%장소용%주려나%라고흥%오군

    HT036%P311%载体构建%免疫共沉淀%相互作用 HT036%P311%載體構建%免疫共沉澱%相互作用
    HT036%P311%재체구건%면역공침정%상호작용
    目的 利用免疫共沉淀技术验证未知蛋白HT036(hypothetical protein,HT036)和P311间的相互作用.方法 构建能在哺乳动物细胞中表达带HA标签的HT036融合蛋白(HA-HT036)的重组载体pCMV-HA-HT036,经酶切鉴定正确后,和表达带Myc标签的P311融合蛋白(Myc-P311)的重组真核表达载体pCMV-Myc-p311,单独或者共转染人293细胞,利用免疫共沉淀技术验证HT036与P311间的相互作用.结果 构建的重组表达载体pCMV-HA-HT036经双酶切鉴定正确,转染293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-P311相互作用蛋白复合物后,用抗HA单克隆抗体进行Western blot检测,可以检测到HA-HT036的表达.结论 成功构建了HA-HT036融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中表达后利用免疫共沉淀技术证实HT036与P311之间存在着相互作用.
    목적 이용면역공침정기술험증미지단백HT036(hypothetical protein,HT036)화P311간적상호작용.방법 구건능재포유동물세포중표체대HA표첨적HT036융합단백(HA-HT036)적중조재체pCMV-HA-HT036,경매절감정정학후,화표체대Myc표첨적P311융합단백(Myc-P311)적중조진핵표체재체pCMV-Myc-p311,단독혹자공전염인293세포,이용면역공침정기술험증HT036여P311간적상호작용.결과 구건적중조표체재체pCMV-HA-HT036경쌍매절감정정학,전염293세포,항Myc단극륭항체침정Myc-P311상호작용단백복합물후,용항HA단극륭항체진행Western blot검측,가이검측도HA-HT036적표체.결론 성공구건료HA-HT036융합단백진핵표체중조재체,재포유동물세포중표체후이용면역공침정기술증실HT036여P311지간존재착상호작용.
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