上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2007年
8期
965-968
,共4页
曹文俊%Bill Sun%徐锋%连兆瑞%Marcy Clayton%Mark Feitelson%樊绮诗
曹文俊%Bill Sun%徐鋒%連兆瑞%Marcy Clayton%Mark Feitelson%樊綺詩
조문준%Bill Sun%서봉%련조서%Marcy Clayton%Mark Feitelson%번기시
精氨酸酶Ⅱ%原发性肝细胞肝癌%丙型肝炎病毒%siRNA
精氨痠酶Ⅱ%原髮性肝細胞肝癌%丙型肝炎病毒%siRNA
정안산매Ⅱ%원발성간세포간암%병형간염병독%siRNA
目的 通过对丙型肝炎病毒-原发性肝细胞肝癌(HCV-HCC)组织及细胞中精氨酸酶Ⅱ(Arg-Ⅱ)的表达进行分析,并以RNA干扰技术阻断其在细胞内的表达,初步研究Arg-Ⅱ表达在HCV-HCC发病中的意义.方法 首先以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7细胞中,以逆转录-实时荧光PCR检测HCV基因组的转录并作细胞生长曲线测定,以Western blotting技术研究HCV基因组转染对细胞内Arg-Ⅱ表达的影响,以免疫组化技术分析HCV-HCC组织中Arg-Ⅱ的表达水平,运用RNA干扰技术对Arg-Ⅱ作初步的功能分析.结果 以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7,成功建立了HuH7-HCV和HuH7-vector两个细胞系,逆转录-实时荧光PCR检测表明HuH7-HCV细胞的HCV转录水平为0.5～5拷贝/细胞.Western blotting结果显示,与对照细胞相比,HuH -7-HCV细胞的Arg-Ⅱ含量升高3.9倍.免疫组化技术分析HCV-HCC组织标本中Arg-Ⅱ的表达,结果呈强阳性,而对照标本中基本不表达.采用RNA干扰方法阻断HuH7-HCV细胞的Arg-Ⅱ表达,发现细胞增殖被明显抑制.结论 Arg-Ⅱ在HCV阳性肝细胞系中及HCV-HCC组织中异常表达并可能参与HCV-HCC的发病机制.
目的 通過對丙型肝炎病毒-原髮性肝細胞肝癌(HCV-HCC)組織及細胞中精氨痠酶Ⅱ(Arg-Ⅱ)的錶達進行分析,併以RNA榦擾技術阻斷其在細胞內的錶達,初步研究Arg-Ⅱ錶達在HCV-HCC髮病中的意義.方法 首先以基因轉染技術分彆將HCV基因組和對照質粒導入HuH7細胞中,以逆轉錄-實時熒光PCR檢測HCV基因組的轉錄併作細胞生長麯線測定,以Western blotting技術研究HCV基因組轉染對細胞內Arg-Ⅱ錶達的影響,以免疫組化技術分析HCV-HCC組織中Arg-Ⅱ的錶達水平,運用RNA榦擾技術對Arg-Ⅱ作初步的功能分析.結果 以基因轉染技術分彆將HCV基因組和對照質粒導入HuH7,成功建立瞭HuH7-HCV和HuH7-vector兩箇細胞繫,逆轉錄-實時熒光PCR檢測錶明HuH7-HCV細胞的HCV轉錄水平為0.5～5拷貝/細胞.Western blotting結果顯示,與對照細胞相比,HuH -7-HCV細胞的Arg-Ⅱ含量升高3.9倍.免疫組化技術分析HCV-HCC組織標本中Arg-Ⅱ的錶達,結果呈彊暘性,而對照標本中基本不錶達.採用RNA榦擾方法阻斷HuH7-HCV細胞的Arg-Ⅱ錶達,髮現細胞增殖被明顯抑製.結論 Arg-Ⅱ在HCV暘性肝細胞繫中及HCV-HCC組織中異常錶達併可能參與HCV-HCC的髮病機製.
목적 통과대병형간염병독-원발성간세포간암(HCV-HCC)조직급세포중정안산매Ⅱ(Arg-Ⅱ)적표체진행분석,병이RNA간우기술조단기재세포내적표체,초보연구Arg-Ⅱ표체재HCV-HCC발병중적의의.방법 수선이기인전염기술분별장HCV기인조화대조질립도입HuH7세포중,이역전록-실시형광PCR검측HCV기인조적전록병작세포생장곡선측정,이Western blotting기술연구HCV기인조전염대세포내Arg-Ⅱ표체적영향,이면역조화기술분석HCV-HCC조직중Arg-Ⅱ적표체수평,운용RNA간우기술대Arg-Ⅱ작초보적공능분석.결과 이기인전염기술분별장HCV기인조화대조질립도입HuH7,성공건립료HuH7-HCV화HuH7-vector량개세포계,역전록-실시형광PCR검측표명HuH7-HCV세포적HCV전록수평위0.5～5고패/세포.Western blotting결과현시,여대조세포상비,HuH -7-HCV세포적Arg-Ⅱ함량승고3.9배.면역조화기술분석HCV-HCC조직표본중Arg-Ⅱ적표체,결과정강양성,이대조표본중기본불표체.채용RNA간우방법조단HuH7-HCV세포적Arg-Ⅱ표체,발현세포증식피명현억제.결론 Arg-Ⅱ재HCV양성간세포계중급HCV-HCC조직중이상표체병가능삼여HCV-HCC적발병궤제.
