中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
3期
420-423
,共4页
周进%田国萍%吴丽华%朱春艳%王静娥%朱峰%胡凤洁
週進%田國萍%吳麗華%硃春豔%王靜娥%硃峰%鬍鳳潔
주진%전국평%오려화%주춘염%왕정아%주봉%호봉길
脂肪组织%干细胞%神经元%分化
脂肪組織%榦細胞%神經元%分化
지방조직%간세포%신경원%분화
目的:脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞并表达神经元信号已有报道.实验拟观察人脂肪组织源性干细胞定向诱导分化为神经元样细胞的可能性.方法:实验于2003-09/2005-06在沈阳脑科医院试验中心完成.腹部脂肪由沈阳市第一医院普外科提供,患者对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准.提取人脂肪组织分离、原代培养、扩增脂肪组织源性干细胞,以免疫荧光化学染色方法鉴定细胞CD44,CD114,CD34的表达.取第二、三代细胞以PBS缓冲液冲洗后,用含有丁酸酯羟基茴香醚、KCL、丙戊酸、地塞米松、胰岛素的培养液诱导向神经细胞分化,采用免疫荧光化学染色方法鉴定神经元特异性烯醇化酶.结果:原代培养的脂肪组织源性干细胞为梭形散在细胞,培养至7 d左右细胞接近融合.荧光倒置显微镜下观察经免疫荧光染色,96.7%细胞呈CD44阳性, CD114抗体、CD34抗体呈阴性.神经元特异性烯醇化酶免疫荧光鉴定可见诱导后细胞出现类似轴突和树突样结构,有类神经元间网络形成,表达神经元特异性标志物神经元特异性烯醇化酶.结论:人脂肪组织源性干细胞可在体外扩增,在一定培养条件下,有分化为神经元样细胞的能力.
目的:脂肪組織源性榦細胞分化為神經元樣細胞併錶達神經元信號已有報道.實驗擬觀察人脂肪組織源性榦細胞定嚮誘導分化為神經元樣細胞的可能性.方法:實驗于2003-09/2005-06在瀋暘腦科醫院試驗中心完成.腹部脂肪由瀋暘市第一醫院普外科提供,患者對實驗知情同意,併經醫院倫理委員會批準.提取人脂肪組織分離、原代培養、擴增脂肪組織源性榦細胞,以免疫熒光化學染色方法鑒定細胞CD44,CD114,CD34的錶達.取第二、三代細胞以PBS緩遲液遲洗後,用含有丁痠酯羥基茴香醚、KCL、丙戊痠、地塞米鬆、胰島素的培養液誘導嚮神經細胞分化,採用免疫熒光化學染色方法鑒定神經元特異性烯醇化酶.結果:原代培養的脂肪組織源性榦細胞為梭形散在細胞,培養至7 d左右細胞接近融閤.熒光倒置顯微鏡下觀察經免疫熒光染色,96.7%細胞呈CD44暘性, CD114抗體、CD34抗體呈陰性.神經元特異性烯醇化酶免疫熒光鑒定可見誘導後細胞齣現類似軸突和樹突樣結構,有類神經元間網絡形成,錶達神經元特異性標誌物神經元特異性烯醇化酶.結論:人脂肪組織源性榦細胞可在體外擴增,在一定培養條件下,有分化為神經元樣細胞的能力.
목적:지방조직원성간세포분화위신경원양세포병표체신경원신호이유보도.실험의관찰인지방조직원성간세포정향유도분화위신경원양세포적가능성.방법:실험우2003-09/2005-06재침양뇌과의원시험중심완성.복부지방유침양시제일의원보외과제공,환자대실험지정동의,병경의원윤리위원회비준.제취인지방조직분리、원대배양、확증지방조직원성간세포,이면역형광화학염색방법감정세포CD44,CD114,CD34적표체.취제이、삼대세포이PBS완충액충세후,용함유정산지간기회향미、KCL、병무산、지새미송、이도소적배양액유도향신경세포분화,채용면역형광화학염색방법감정신경원특이성희순화매.결과:원대배양적지방조직원성간세포위사형산재세포,배양지7 d좌우세포접근융합.형광도치현미경하관찰경면역형광염색,96.7%세포정CD44양성, CD114항체、CD34항체정음성.신경원특이성희순화매면역형광감정가견유도후세포출현유사축돌화수돌양결구,유류신경원간망락형성,표체신경원특이성표지물신경원특이성희순화매.결론:인지방조직원성간세포가재체외확증,재일정배양조건하,유분화위신경원양세포적능력.