CAJ | 학술논문

背景与目的:近些年的研究发现,Notch-1基因在人脑胶质母细胞瘤的发生、发展中起到了重要的作用.本研究旨在观察靶向Notch-1基因的小干扰RNA(siRNA)对人脑胶质母细胞瘤裸鼠体内成瘤性的影响.方法:以OligofectamineTM为载体将靶向Notch-1基因的SiRNA转染人脑胶质母细胞瘤细胞系TJ905中,并设立无意序列siRNA(nonsense siRNA)转染组.然后,把经Notch-1 siRNA和经无意序列siRNA转染的细胞及未经转染的细胞分为3组.每组细胞悬液注射裸鼠5只,注射量按1×107/mL无血清培养基注射入每只裸鼠皮下200 μL,观察动物的成瘤情况,每隔3 d记录-下裸鼠移植瘤的体积V=(ab2)/2(a为肿瘤的长径,b为肿瘤的宽径),并在接种成瘤后对各组动物进行相应的SiRNA/Oligofectamine TM混合物的瘤内注射治疗,对照组注射等量的PBS.观察20 d后处死动物,取出肿瘤组织,常规石蜡包埋,组织切片HE染色并进行Notch-1的免疫组化染色测定.结果:裸鼠处死后观察肿瘤直径:Notch-1 siRNA转染组为(1 203±206)mm3,siRNA转染组为(2 241±401)mm3,对照组为(2 309±466)mm3,Notch-1 siRNA转染组与无意siRNA转染组,以及Notch-1siRNA转染组与对照组之间比较均有统计学意义(P<0.05).免疫组化结果显示:Notch-1的表达在Notch-1siRNA转染组与其他两组之间的比较也同样具有统计学意义(P<0.01).结论:靶向Notch-1基因的siRNA可以通过有效地降低肿瘤细胞Notch-1的表达来抑制裸鼠皮下胶质母细胞瘤移植瘤的生长,但还需要对siRNA的合理使用剂量与转染方式进行更加深入的研究.
배경여목적:근사년적연구발현,Notch-1기인재인뇌효질모세포류적발생、발전중기도료중요적작용.본연구지재관찰파향Notch-1기인적소간우RNA(siRNA)대인뇌효질모세포류라서체내성류성적영향.방법:이OligofectamineTM위재체장파향Notch-1기인적SiRNA전염인뇌효질모세포류세포계TJ905중,병설립무의서렬siRNA(nonsense siRNA)전염조.연후,파경Notch-1 siRNA화경무의서렬siRNA전염적세포급미경전염적세포분위3조.매조세포현액주사라서5지,주사량안1×107/mL무혈청배양기주사입매지라서피하200 μL,관찰동물적성류정황,매격3 d기록-하라서이식류적체적V=(ab2)/2(a위종류적장경,b위종류적관경),병재접충성류후대각조동물진행상응적SiRNA/Oligofectamine TM혼합물적류내주사치료,대조조주사등량적PBS.관찰20 d후처사동물,취출종류조직,상규석사포매,조직절편HE염색병진행Notch-1적면역조화염색측정.결과:라서처사후관찰종류직경:Notch-1 siRNA전염조위(1 203±206)mm3,siRNA전염조위(2 241±401)mm3,대조조위(2 309±466)mm3,Notch-1 siRNA전염조여무의siRNA전염조,이급Notch-1siRNA전염조여대조조지간비교균유통계학의의(P<0.05).면역조화결과현시:Notch-1적표체재Notch-1siRNA전염조여기타량조지간적비교야동양구유통계학의의(P<0.01).결론:파향Notch-1기인적siRNA가이통과유효지강저종류세포Notch-1적표체래억제라서피하효질모세포류이식류적생장,단환수요대siRNA적합리사용제량여전염방식진행경가심입적연구.