抗人B7-H1单克隆抗体的制备和鉴定
항인B7-H1단극륭항체적제비화감정
Preparation and Identification of Anti-Human B7-H1 Monoclonal Antibody
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2010年 4期 531-534 ,共4页

    舒震%侯登勇%李晶%侯健伟%徐玉金%陈琳%张伟%张英起

    서진%후등용%리정%후건위%서옥금%진림%장위%장영기

    人B7-H1%杂交瘤细胞%单克隆抗体 人B7-H1%雜交瘤細胞%單剋隆抗體
    인B7-H1%잡교류세포%단극륭항체
    目的:采用杂交瘤技术制备抗人B7-H1单克隆抗体,并对共进行鉴定.方法:经抗原免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞以常规方法融合;用闻接ELISA法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法获得稳定分泌抗人B7-H1单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩增杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后制备腹水;纯化腹水中的单克隆抗体并对其亚型进行鉴定;用间接ELISA法测抗体效价;将肺癌组织制成石蜡切片,用抗人B7-H1抗体进行免疫组化染色.结果:获得1株稳定分泌抗人B7-H1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型为IgG1;抗体效价为1×108,纯化后的抗体含量为6.76 g/L;免疫组化实验中,单抗可与肺癌组织表面的B7-H1蛋白特异地结合.结论:制备了人B7-H1单克隆抗体,为B7-H1检测试剂盒的研制奠定了基础.
    목적:채용잡교류기술제비항인B7-H1단극륭항체,병대공진행감정.방법:경항원면역적소서비세포여소서골수류세포이상규방법융합;용문접ELISA법사선분비항체적잡교류세포주;양성극륭용유한희석법획득은정분비항인B7-H1단극륭항체적잡교류세포주;확증잡교류세포주사진소서복강후제비복수;순화복수중적단극륭항체병대기아형진행감정;용간접ELISA법측항체효개;장폐암조직제성석사절편,용항인B7-H1항체진행면역조화염색.결과:획득1주은정분비항인B7-H1단극륭항체적잡교류세포주,소분비적단항류형위IgG1;항체효개위1×108,순화후적항체함량위6.76 g/L;면역조화실험중,단항가여폐암조직표면적B7-H1단백특이지결합.결론:제비료인B7-H1단극륭항체,위B7-H1검측시제합적연제전정료기출.
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