中华医学美学美容杂志
中華醫學美學美容雜誌
중화의학미학미용잡지
CHINESE JOURNAL OF MEDICAL AESTHETICS AND COSMETOLOGY
2007年
5期
288-291
,共4页
刘天一%周广东%陈瑾君%崔磊%刘伟%曹谊林
劉天一%週廣東%陳瑾君%崔磊%劉偉%曹誼林
류천일%주엄동%진근군%최뢰%류위%조의림
骨髓间充质细胞%β1转化生长因子%软骨%组织工程
骨髓間充質細胞%β1轉化生長因子%軟骨%組織工程
골수간충질세포%β1전화생장인자%연골%조직공정
目的 探讨β1转化生长因子(TGF-β1)浓度对体外诱导猪骨髓间充质细胞(BMSCs)构建组织工程化软骨的影响,明确TGF-β1诱导剂量对细胞分化的作用,为体外软骨构建提供适宜的诱导因子应用浓度参数.方法 抽取8周龄猪髂嵴骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得BMSCs,收集第2代细胞,以5×107个/cm3细胞的密度接种到聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形三维支架材料上(直径5 mm,厚度2 mm),7 d后应用不同浓度TGF-β1(A组:5 ng/ml、B组:10 ng/ml、C组:20ng/ml、D组:50 ng/ml)与IGF-Ⅰ(50 ng/ml)及地塞米松(40 ng/ml)组成诱导剂,分别进行体外诱导培养.8周后取材行大体观察,体积、湿重及聚合蛋白多糖(GAG)定量,组织学及Ⅱ型胶原免疫组织化学等检测.结果 B、C、D组形成细胞材料复合物组织学结构较为类似,有明显的软骨陷窝,分布有大量Ⅱ型胶原及GAG;A组软骨陷窝结构较少,胞外基质染色较浅.B、C、D组的组织湿重、体积和GAG含量均明显高于A组.结论 诱导三维支架上的BMSCs体外构建组织工程化软骨过程中,10 ng/ml的TGF-β1诱导浓度具有良好的促分化效能,TGF-1的促分化作用并未表现出明显的剂量依赖性.
目的 探討β1轉化生長因子(TGF-β1)濃度對體外誘導豬骨髓間充質細胞(BMSCs)構建組織工程化軟骨的影響,明確TGF-β1誘導劑量對細胞分化的作用,為體外軟骨構建提供適宜的誘導因子應用濃度參數.方法 抽取8週齡豬髂嵴骨髓,應用貼壁法分選單箇覈細胞,體外培養擴增後穫得BMSCs,收集第2代細胞,以5×107箇/cm3細胞的密度接種到聚羥基乙痠(PGA)製成的圓柱形三維支架材料上(直徑5 mm,厚度2 mm),7 d後應用不同濃度TGF-β1(A組:5 ng/ml、B組:10 ng/ml、C組:20ng/ml、D組:50 ng/ml)與IGF-Ⅰ(50 ng/ml)及地塞米鬆(40 ng/ml)組成誘導劑,分彆進行體外誘導培養.8週後取材行大體觀察,體積、濕重及聚閤蛋白多糖(GAG)定量,組織學及Ⅱ型膠原免疫組織化學等檢測.結果 B、C、D組形成細胞材料複閤物組織學結構較為類似,有明顯的軟骨陷窩,分佈有大量Ⅱ型膠原及GAG;A組軟骨陷窩結構較少,胞外基質染色較淺.B、C、D組的組織濕重、體積和GAG含量均明顯高于A組.結論 誘導三維支架上的BMSCs體外構建組織工程化軟骨過程中,10 ng/ml的TGF-β1誘導濃度具有良好的促分化效能,TGF-1的促分化作用併未錶現齣明顯的劑量依賴性.
목적 탐토β1전화생장인자(TGF-β1)농도대체외유도저골수간충질세포(BMSCs)구건조직공정화연골적영향,명학TGF-β1유도제량대세포분화적작용,위체외연골구건제공괄의적유도인자응용농도삼수.방법 추취8주령저가척골수,응용첩벽법분선단개핵세포,체외배양확증후획득BMSCs,수집제2대세포,이5×107개/cm3세포적밀도접충도취간기을산(PGA)제성적원주형삼유지가재료상(직경5 mm,후도2 mm),7 d후응용불동농도TGF-β1(A조:5 ng/ml、B조:10 ng/ml、C조:20ng/ml、D조:50 ng/ml)여IGF-Ⅰ(50 ng/ml)급지새미송(40 ng/ml)조성유도제,분별진행체외유도배양.8주후취재행대체관찰,체적、습중급취합단백다당(GAG)정량,조직학급Ⅱ형효원면역조직화학등검측.결과 B、C、D조형성세포재료복합물조직학결구교위유사,유명현적연골함와,분포유대량Ⅱ형효원급GAG;A조연골함와결구교소,포외기질염색교천.B、C、D조적조직습중、체적화GAG함량균명현고우A조.결론 유도삼유지가상적BMSCs체외구건조직공정화연골과정중,10 ng/ml적TGF-β1유도농도구유량호적촉분화효능,TGF-1적촉분화작용병미표현출명현적제량의뢰성.