上海免疫学杂志
上海免疫學雜誌
상해면역학잡지
SHANGHAI JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
3期
164-167
,共4页
孙玮%葛海良%王颖%张惠珍%张笑人%周光炎
孫瑋%葛海良%王穎%張惠珍%張笑人%週光炎
손위%갈해량%왕영%장혜진%장소인%주광염
MHC Ⅱ类反式激活蛋白%卵巢癌细胞%IL-4%IFN-γ
MHC Ⅱ類反式激活蛋白%卵巢癌細胞%IL-4%IFN-γ
MHC Ⅱ류반식격활단백%란소암세포%IL-4%IFN-γ
建立稳定表达CⅡTA基因的人卵巢癌细胞株HO-CⅡTA,分析转染CⅡTA基因对T细胞体外抗肿瘤免疫应答的影响.以CⅡTA基因逆转录病毒(pLXSN/CⅡTA)转染并筛选获得HO-CⅡTA.用FACS和RT-PCR分析HLA以及抗原加工递呈基因表达水平.以磁珠法分离得到正常人外周血CD4+/CD8+T细胞,分别进行混合淋巴细胞反应及细胞因子测定(ELISA和RTPCR).结果显示,转染CⅡTA基因后,使HO细胞HLA Ⅱ类分子和LMP7基因表达增高,而Ii基因表达由阳性转为阴性,未检测到TAP1表达;HO和HO-CⅡTA细胞刺激CD4+T细胞分泌IL-4含量两者有显著差异.刺激48 h后达到顶峰,前者分泌量约为后者的1/2,但分泌IFN-γ无差异,RT-PCR与ELISA两种测定结果一致.表明转染CⅡTA基因可增加肿瘤细胞表面MHC Ⅱ类分子的表达,该作用与IFN-γ具有协同效应;并能诱导CD4+T细胞表达IL-4.
建立穩定錶達CⅡTA基因的人卵巢癌細胞株HO-CⅡTA,分析轉染CⅡTA基因對T細胞體外抗腫瘤免疫應答的影響.以CⅡTA基因逆轉錄病毒(pLXSN/CⅡTA)轉染併篩選穫得HO-CⅡTA.用FACS和RT-PCR分析HLA以及抗原加工遞呈基因錶達水平.以磁珠法分離得到正常人外週血CD4+/CD8+T細胞,分彆進行混閤淋巴細胞反應及細胞因子測定(ELISA和RTPCR).結果顯示,轉染CⅡTA基因後,使HO細胞HLA Ⅱ類分子和LMP7基因錶達增高,而Ii基因錶達由暘性轉為陰性,未檢測到TAP1錶達;HO和HO-CⅡTA細胞刺激CD4+T細胞分泌IL-4含量兩者有顯著差異.刺激48 h後達到頂峰,前者分泌量約為後者的1/2,但分泌IFN-γ無差異,RT-PCR與ELISA兩種測定結果一緻.錶明轉染CⅡTA基因可增加腫瘤細胞錶麵MHC Ⅱ類分子的錶達,該作用與IFN-γ具有協同效應;併能誘導CD4+T細胞錶達IL-4.
건립은정표체CⅡTA기인적인란소암세포주HO-CⅡTA,분석전염CⅡTA기인대T세포체외항종류면역응답적영향.이CⅡTA기인역전록병독(pLXSN/CⅡTA)전염병사선획득HO-CⅡTA.용FACS화RT-PCR분석HLA이급항원가공체정기인표체수평.이자주법분리득도정상인외주혈CD4+/CD8+T세포,분별진행혼합림파세포반응급세포인자측정(ELISA화RTPCR).결과현시,전염CⅡTA기인후,사HO세포HLA Ⅱ류분자화LMP7기인표체증고,이Ii기인표체유양성전위음성,미검측도TAP1표체;HO화HO-CⅡTA세포자격CD4+T세포분비IL-4함량량자유현저차이.자격48 h후체도정봉,전자분비량약위후자적1/2,단분비IFN-γ무차이,RT-PCR여ELISA량충측정결과일치.표명전염CⅡTA기인가증가종류세포표면MHC Ⅱ류분자적표체,해작용여IFN-γ구유협동효응;병능유도CD4+T세포표체IL-4.
